搜索结果: 31-45 共查到“家畜病毒学 猪瘟病毒”相关记录76条 . 查询时间(0.125 秒)
猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR-RFLP鉴别检测方法的建立
猪瘟病毒 野毒株 兔化弱毒疫苗株 RT-PCR-RFLP
<
2013/12/2
本研究旨在建立猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR-RFLP鉴别检测方法。根据Shimen株设计1对特异性引物,建立猪瘟病毒 RT-PCR-RFLP检测方法;对20份疑似猪瘟临床样品进行检测,并对检出的山东8株流行野毒株和2株疫苗株PCR产物进行克隆与序列分析,验证上述方法。结果RT-PCR扩增片段为825 bp,产物经RFLP分析,野毒株的PCR产物能被ApaⅠ酶切为322 bp和503 ...
一种用于非洲猪瘟病毒检测的PCR方法
聚合酶链式反应 非洲猪瘟 诊断
<
2013/12/3
基于非洲猪瘟病毒(ASFV)VP72基因设计引物,建立一种检测非洲猪瘟病毒的PCR方法。应用本研究所建立的方法与OIE参考的方法进行比较,并对参考实验室提供的非洲猪瘟病毒17个分离株的基因组以及本实验室收集的野外样品进行检测。结果显示:本研究设计的引物具有良好的特异性,与猪的其他病原没有交叉反应;其敏感性与OIE参考的方法相当;所建立的PCR方法能够成功扩增非洲猪瘟病毒17个分离株的基因组,野外样...
猪瘟病毒3′非编码区的多态性及其二级结构分析
猪瘟病毒 3′-UTR 不均一性 二级结构分析
<
2010/4/1
【目的】分析CSFV 3′-UTR一级序列和二级结构,为研究其对病毒复制、增殖和毒力的关系奠定良好的基础。【方法】利用RT-PCR技术扩增CSFV Thiverval株、HCLV株和Shimen株的3′-UTR并测序,使用DNAstar、Sequencher和RNAstructure软件进行CSFV 3′-UTR基因组序列的比对分析和二级结构模拟。【结果】Thiverval株3′-UTR最长可达2...
猪瘟病毒低温诱变疫苗Thiverval株感染性克隆的构建及病毒拯救
猪瘟病毒 疫苗Thiverval株 感染性克隆 病毒拯救
<
2009/11/3
采用高保真DNA聚合酶,分7个片段扩增猪瘟病毒(CSFV)Thiverval株全基因组序列,克隆至pMD18T载体并测序。经适当的连接策略将各片段连接克隆至低拷贝载体质粒pAC/F101,同时对病毒基因组5′和3′末端进行修饰,构建出含有T7启动子、榔头状(HH)核酶基因、CSFV Thiverval全基因组、丁型肝炎病毒(HDV)核酶基因和T7终止子的重组质粒pAC/F101/T17。利用T...
猪瘟病毒3′非编码区的多态性及其二级结构分析
猪瘟病毒 3′-UTR 不均一性 二级结构分析
<
2010/3/16
【目的】分析CSFV 3′-UTR一级序列和二级结构,为研究其对病毒复制、增殖和毒力的关系奠定良好的基础。【方法】利用RT-PCR技术扩增CSFV Thiverval株、HCLV株和Shimen株的3′-UTR并测序,使用DNAstar、Sequencher和RNAstructure软件进行CSFV 3′-UTR基因组序列的比对分析和二级结构模拟。【结果】Thiverval株3′-UTR最长可达2...
猪瘟病毒E2基因噬菌体展示多肽库的构建及表位鉴定
猪瘟病毒 E2蛋白 抗原表位 噬菌体展示多肽库
<
2010/1/29
本研究通过建立CSFV噬菌体展示多肽库,并对其进行生物淘选,以期获得E2蛋白上新的抗原表位。选择CSFV石门株(SM)和疫苗株(HCLV)为代表株,采用噬菌体展示技术,以T7select4151b为载体,分别构建了CSFV SM株和HCLV株E2基因噬菌体展示多肽库(SME2 库和HCLVE2 库)。通过生物淘选和噬菌体原位杂交技术,采用7株猪瘟单克隆抗体和1株猪瘟高免血清分别对构建的SM...
猪瘟病毒低温诱变疫苗Thiverval株感染性克隆的构建及病毒拯救
猪瘟病毒 疫苗Thiverval株 感染性克隆 病毒拯救
<
2013/12/9
采用高保真DNA聚合酶,分7个片段扩增猪瘟病毒(CSFV)Thiverval株全基因组序列,克隆至pMD18T载体并测序。经适当的连接策略将各片段连接克隆至低拷贝载体质粒pAC/F101,同时对病毒基因组5′和3′末端进行修饰,构建出含有T7启动子、榔头状(HH)核酶基因、CSFV Thiverval全基因组、丁型肝炎病毒(HDV)核酶基因和T7终止子的重组质粒pAC/F101/T17。利用T...
逆转录病毒载体RNAi技术抑制猪瘟病毒在猪胚胎成纤维细胞的增殖
猪瘟病毒 猪胚胎成纤维细胞 RNA干扰 逆转录病毒载体
<
2009/7/20
摘要:利用针对猪瘟病毒(Classical swine fever virus , CSFV)石门株Npro基因mRNA的shRNA逆转录病毒表达载体,转导猪胚胎成纤维细胞,在G418的筛选压力下,获得7个稳定整合shRNA表达构件的猪胚胎成纤维细胞株。以100TCID50的CSFV分别感染96孔板内的上述细胞克隆,72h后以对感染细胞克隆的进行间接免疫荧光分析及子代病毒滴度检测,结果显示,在所获...
非洲猪瘟病毒VP73 蛋白的B 细胞表位预测
非洲猪瘟病毒 VP73蛋白 B细胞表位
<
2009/6/17
[ 目的] 预测非洲猪瘟病毒VP73 蛋白的B 细胞表位。[ 方法] 综合分析二级结构、亲水性、表面可及性与抗原性指数, 预测非洲猪
瘟病毒VP73 蛋白的抗原表位。[ 结果] 推测B 细胞表位位于非洲猪瘟病毒VP73 蛋白N 端的11 ~18 、26 ~48 、73 ~82 、136 ~150 、159 ~174 、181 ~189 、191 ~210 、247 ~276 、279 ~295...
应用猪瘟病毒(CSFV)及北美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)特异性引物和TaqMan水解探针,建立一种同时检测CSFV和PRRSV的复合荧光定量RT-PCR方法。该方法可检测到3.2 TCID50的CSFV和1.8 TCID50的北美洲型PRRSV,比常规PCR方法敏感性高50倍以上。用复合荧光定量RT-PCR方法对155份现地样品进行检测,结果73份为PRRSV阳性,16份为CSFV阳...
猪瘟病毒E2 基因的克隆及其初步鉴定
猪瘟病毒 E2基因 克隆
<
2009/5/20
[ 目的] 为了研究猪瘟病毒E2 蛋白的抗原性质和进一步筛选保护性抗原表位。[ 方法] 克隆猪瘟病毒E2 蛋白的部分基因片段, 通
过自行设计的一对引物, 应用RT- PCR 从猪瘟兔化弱毒株细胞培养物, 扩增出一DNA 片段, 并对其进行鉴定。[ 结果] 经初步鉴定, 该片
段大小约703 bp , 核苷酸序列测定结果表明该片段为E2 蛋白基因。[ 结论] 该研究为筛选CSFV 抗原奠定了...
RT-PCR技术检测河南省猪瘟病毒的研究
猪瘟病毒 RT-PCR
<
2009/4/27
对25个猪场进行流行病学调查,对191只疑似猪瘟发病猪进行RT-PCR 检测,结果表明,猪瘟阳性检出率平均为77.4 %。
气候突然变化会造成仔猪应激, 引发大肠杆菌在体内增殖, 使仔猪机体抵抗力下降, 进而引发与猪瘟混合感染; 借助实验室化验、
检测可作出鉴别, 采取综合防治措施可控制病情。
整合猪瘟病毒囊膜蛋白的假型鼠白血病病毒感染性的研究
猪瘟病毒(CSFV) 囊膜蛋白 鼠白血病病毒 假型病毒 感染性
<
2009/1/15
整合猪瘟病毒囊膜蛋白的假型鼠白血病病毒感染性的研究。