搜索结果: 1-15 共查到“兽医学 荧光定量RT-PCR”相关记录16条 . 查询时间(0.085 秒)
猪丁型冠状病毒（PDCoV）与猪流行性腹泻病毒（PEDV）均为致病性冠状病毒，可以引起猪呕吐、腹泻脱水和新生仔猪死亡。为了建立一种快速检测PDCoV和PEDV的双重SYBR Green I荧光定量RT-PCR方法，根据GenBank登录的2种病毒基因的保守序列，设计了两对特异性引物，分别扩增其N、M基因保守区，并将其克隆至pMD19-T载体；将10倍梯度稀释的混合重组质粒作为标准品模板，建立了一种...
检测施马伦贝格病毒核酸的荧光定量RT-PCR方法
施马伦贝格病毒 核酸 引物 TaqMan探针 荧光定量RT-PCR
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2014/12/26
根据施马伦贝格病毒（Schmallenberg virus，SBV）S基因节段设计一对引物和TaqMan探针，建立了检测SBV核酸的荧光定量RT-PCR方法。通过优化反应体系和反应条件，该方法对101～107半数组织培养感染量（TCID50）的SBV核酸呈现良好的线性关系。利用德国FLI制备和保存的SBV核酸阳性（n=140）、SBV核酸阴性（n=132）和辛波血清群相关病毒核酸样品（n=16），...
马Toll样受体表达水平SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR检测方法的建立
马 Toll样受体 骨髓 SYBR Green Ⅰ 荧光定量RT-PCR
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2013/11/29
旨在建立一种检测马Toll样受体（TLRs）mRNA表达水平的SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR（Rverse Transcription-Polymerase Chain Reaction）方法。参照GenBank中马TLRs的基因序列保守区设计特异性引物，以马β肌动蛋白（β-actin）mRNA为内参，建立荧光定量RT-PCR方法。结果，扩增曲线在1×102～1×108 copies...
猪札幌病毒TaqMan荧光定量RTPCR检测方法的建立及初步应用
猪札幌病毒 TaqMan 探针 荧光定量RTPCR
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2013/12/9
根据猪札幌病毒（Porcine Sapovirus, SaV)的VP1保守基因序列设计引物和探针，通过对荧光定量RTPCR反应条件的优化，建立了TaqMan荧光定量RTPCR检测方法，并与常规RTPCR检测方法进行了比较。结果表明，荧光定量RTPCR方法的检测灵敏度可达16.1拷贝·μL1，而常规RTPCR方法的灵敏度为1.61 ×103拷贝·μL1。对216份粪样的检测结果进一步表...
根据猪札幌病毒（Porcine Sapovirus, SaV)的VP1保守基因序列设计引物和探针，通过对荧光定量RTPCR反应条件的优化，建立了TaqMan荧光定量RTPCR检测方法，并与常规RTPCR检测方法进行了比较。结果表明，荧光定量RTPCR方法的检测灵敏度可达16.1拷贝·μL1，而常规RTPCR方法的灵敏度为1.61 ×103拷贝·μL1。对216份粪样的检测结果进一步表...
根据新城疫病毒M基因的保守序列，设计合成1对引物和TaqMan 探针,以作者实验室构建并保存的鹅源新城疫病毒ZJ1株M基因阳性重组质粒为标准品模板建立荧光定量PCR标准曲线,结合ABI公司的7300型荧光定量PCR仪,建立了一种敏感、特异、重复性好的快速检测新城疫病毒核酸载量的TaqMan荧光定量RTPCR方法。该方法在106～101拷贝范围内具有良好的线性关系,可检测到初始模板中3拷贝·μL-...
应用猪瘟病毒（CSFV）及北美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）特异性引物和TaqMan水解探针，建立一种同时检测CSFV和PRRSV的复合荧光定量RT-PCR方法。该方法可检测到3.2 TCID50的CSFV和1.8 TCID50的北美洲型PRRSV，比常规PCR方法敏感性高50倍以上。用复合荧光定量RT-PCR方法对155份现地样品进行检测，结果73份为PRRSV阳性，16份为CSFV阳...
猪hsp70和hsp90荧光定量RT—PCR检测方法的建立
猪 hsp70 hsp90 GAPDH 荧光定量RT-PCR
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2009/1/15
猪hsp70和hsp90荧光定量RT—PCR检测方法的建立。
荧光定量RT-PCR检测鸡CD4、CD8基因表达水平
荧光定量RT-PCR 鸡 CD4 CD8 mRNA
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2008/12/1
白细胞分化抗原CD4和CD8在机体免疫应答及其信号传递过程中发挥着重要作用。本试验建立了定量检测鸡CD4和CD8 mRNA表达水平的SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR（RRT-PCR）方法，并采用该方法对26～50日龄商品鸡外周血淋巴细胞（PBL）中CD4和CD8 mRNA表达水平进行了检测。结果显示：所建立的RRT-PCR对CD4和CD8 mRNA的扩增效率分别为93%和91%；线...
TaqMan荧光定量RT-PCR检测猪脂蛋白酯酶mRNA方法的建立
猪 脂蛋白酯酶 实时定量RT-PCR TaqMan荧光探针
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2008/10/27
【目的】克隆猪cDNA，作为猪LPL mRNA定量检测的标准品，建立检测方法。【方法】用RT-PCR，从猪背最长肌的总RNA中逆转录扩增LPL的cDNA，将纯化的LPL cDNA与pGM-T载体进行连接,转化宿主菌TOP10，提取重组质粒DNA，PCR鉴定并测序分析,对质粒标准进行实时荧光定量PCR 检测。纯化质粒并检测260 nm吸光度,确定原液的重组质粒拷贝浓度并以此制备荧光定量PCR梯度浓度...
荧光定量RT-PCR法检测运输应激猪热休克蛋白mRNA转录水平
猪 热休克蛋白 SYBR Green I 荧光定量PCR 运输应激
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2008/9/1
【目的】探讨应激时热休克蛋白mRNA转录水平的变化。【方法】根据HSP90、HSP70和GAPDH mRNA序列，设计并合成引物，将PCR扩增的基因片段克隆到pGEM-T载体，重组质粒经筛选、鉴定，体外转录出RNA，梯度稀释作为阳性模板，用于标准曲线的制定和样品检测，建立了一步法实时荧光定量RT-PCR技术平台，并用于检测长途运输猪心脏和肝脏中HSP70及HSP90 mRNA转录水平的改变。【结果...
猪瘟病毒实时荧光定量RT-PCR的建立及其对人工感染猪体内猪瘟病毒的检测
人工感染猪 RT-PCR 猪瘟病毒
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2008/4/1
本研究应用猪瘟病毒通用引物和野毒特异性TaqMan探针，并以质粒作为阳性标准品，结合Corbett公司的RotorGene3000荧光定量PCR仪，建立了一种敏感、特异、重复性好的快速检测猪瘟病毒核酸载量的TaqMan荧光定量RT-PCR方法。该方法在108~101范围内具有良好的线性关系，可检测到初始模板中10 拷贝/μL的病毒核酸，与本实验室建立的RT-套式PCR（RT-nPCR）具有相近的敏...
猪传染性胃肠炎病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立
RT-PCR检测方法 TaqMan 传染性胃肠炎 猪
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2008/3/31
根据猪传染性胃肠炎病毒和猪肌动蛋白的基因序列设计合成了引物和探针，通过对荧光定量RT-PCR反应条件的优化，建立了TaqMan荧光定量RT-PCR检测TGEV的方法。同时对37份现地病料进行检测并与常规RT-PCR方法、TGEV抗原快速检测试剂盒比较。结果，该方法的检测敏感性达到15.3拷贝/µL，且具有很好的特异性和重复性，而常规RT-PCR方法只能检测到1.53×103拷贝/&mi...
荧光定量RT-PCR检测鸡CD4、CD8基因表达水平
荧光定量RT-PCR 鸡 CD4 CD8 mRNA
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2008/3/28
白细胞分化抗原CD4和CD8在机体免疫应答及其信号传递过程中发挥着重要作用。本实验建立了定量检测鸡CD4和CD8 mRNA表达水平的SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR（RRT-PCR）方法，并采用该方法对26～50日龄商品鸡外周淋巴细胞（PBL）中CD4和CD8 mRNA表达水平进行了检测。结果显示：所建立的RRT-PCR对CD4和CD8 mRNA的扩增效率分别为93%和91%；线...
猪瘟病毒实时荧光定量RT-PCR的建立及其对人工感染猪体内猪瘟病毒的检测
猪瘟病毒 荧光定量RT-PCR TaqMan荧光探针 RT-nPCR
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2013/12/27
本研究应用猪瘟病毒通用引物和野毒特异性TaqMan探针，并以质粒作为阳性标准品，结合Corbett公司的RotorGene3000荧光定量PCR仪，建立了一种敏感、特异、重复性好的快速检测猪瘟病毒核酸载量的TaqMan荧光定量RT-PCR方法。该方法在108~101范围内具有良好的线性关系，可检测到初始模板中10 拷贝/μL的病毒核酸，与本实验室建立的RT-套式PCR（RT-nPCR）具有相近的敏...