搜索结果: 1-15 共查到“兽医学 慢病毒”相关记录17条 . 查询时间(0.186 秒)
探究RNA干扰（RNA interference，RNAi）技术对口蹄疫病毒复制的抑制作用，本研究选取O型口蹄疫病毒ON株，以ON株口蹄疫病毒3C、3D、VP1蛋白基因作为靶基因。对每一个靶基因设计并合成两对小片段发夹RNA （short hairpin RNA，shRNA）引物，分别命名为VP1-1、VP1-2、3C-1、3C-2、3D-1、3D-2，依据RNAi的原理构建6个shRNA的重组表...
慢病毒介导siRNA抑制1型鸭肝炎病毒复制
GDD模体 RdRp RNA干扰 siRNA
<
2017/4/1
为筛选能抑制DHAV-1复制的siRNA，探索RNAi技术在鸭病毒性肝炎防治中的应用，采用PCR法扩增DHAV-1 RdRp基因，并构建pEGFP-RdRp融合表达EGFP-RdRp蛋白；根据RdRp的序列测定结果，设计3条RdRp特异siRNA，并合成相应shRNA分别插入pmiRZipΔ中构建pRdRp-shRNA；共转染pRdRp-shRNA和pEGFP-RdRp于HEK-293T细胞，通过...
慢病毒介导稳定表达抑制PRRSV复制的shRNA细胞系的建立
PRRSV shRNA Marc-145细胞系 慢病毒表达技术
<
2016/12/7
利用慢病毒表达技术将稳定持续抑制PRRSV复制的shRNA导入Marc-145细胞，建立稳定表达靶向抑制PRRSV复制的shRNA的Marc-145阳性细胞克隆，并从细胞模型水平阐明抑制PRRSV复制的关键靶基因的干扰效果。采用LR重组技术，将pENTR/U6/Nsp9-4、pENTR/U6/Nsp9-6及pENTR/U6/-CON分别与pDEST载体进行LR重组，获得表达骨架，重组后的表达载体在...
白绒山羊PPARγ基因RNA干扰慢病毒载体的构建及对肌内脂肪细胞增殖分化的影响
肌内脂肪细胞 RNA干扰 PPAR&gamma
<
2016/4/29
本研究以绒山羊肌内脂肪细胞为试验材料，通过靶向阻断过氧化物酶体增殖物激活受体PPARγ基因，建立稳定干扰的肌内脂肪细胞株，探讨绒山羊PPARγ基因在肌内脂肪细胞增殖和分化过程中的功能。采用慢病毒质粒包装系统构建特异靶向白绒山羊PPARγ基因的RNA干扰（RNA interference，RNAi ）慢病毒载体，用以建立PPARγ基因稳定沉默的肌内脂肪细胞株。利用实时定量和Western blot ...
早期胚胎血管显微注射慢病毒载体制备转基因禽类的研究
显微注射 慢病毒载体 转基因禽类 增强型绿色荧光蛋白
<
2015/12/30
根据禽类独特的生殖生理特点及特殊的胚胎发育模式，把原始生殖细胞法、显微注射法和慢病毒载体法3种转基因技术结合起来，以期探索出简便、高效的生产转基因禽类新方法。在鹌鹑胚胎发育至第13~15期，血液循环中的原始生殖细胞（Primordial germ cells，PGCs）数目达到最高值，血管显微注射携带增强型绿色荧光蛋白基因（Enhanced green fluorescent protein，eG...
猪MyD88基因干扰重组慢病毒载体的构建、病毒包装及效果评价
猪 MyD88基因 基因沉默 慢病毒载体
<
2015/5/28
髓性分化因子88 (MyD88) 作为TLRs/IL-1R信号通路中重要的接头蛋白，在免疫应答和疾病防御中起重要作用，作者拟通过慢病毒介导的RNA干扰技术获得MyD88基因沉默的猪小肠上皮细胞，为致病菌引起肠道疾病机制研究提供有效模型。共构建4个靶向猪MyD88基因的shRNA表达载体和1个MyD88基因高表达载体，通过实时荧光定量PCR方法鉴定瞬时共转染293细胞中MyD88基因转录水平，筛选获...
本研究旨在通过慢病毒载体系统将猪源CD163转染入永生化的猪肺泡巨噬细胞（PAM）系(CRL-2843)，建立稳定表达CD163的PAM细胞系（PAM-CD163）及验证该细胞系对PRRSV的易感性。用PCR方法从pJET1.2-CD163载体上扩增CD163基因编码区，通过酶切连接构建慢病毒表达载体pTrip-CMV-CD163-IRES-pur。将该质粒与慢病毒包装质粒psPAX2和pMD2....
本试验旨在构建4条鸡斑联蛋白（zyxin）基因的RNAi慢病毒载体，对其进行滴度测定，并进行有效干扰靶点的筛选，为以后开展鸡zyxin基因抗球虫机理的研究奠定基础。提取鸡胸腺组织的RNA，反转录，扩增zyxin基因的编码区，并将其克隆到真核表达载体Pex-6上。设计针对zyxin的shRNA序列，应用基因重组技术插入到Lv3慢病毒表达载体中，将lv3-shRNA载体与包装质粒pGag/Pol、pR...
为研究视黄醇结合蛋白4(retinol binding protein 4, RBP4)对猪前体脂肪细胞分化的影响，笔者构建了RBP4重组慢病毒干扰载体，包装并感染猪前体脂肪细胞，采用BODIPY和油红O染色以及real-time PCR等方法，从形态学和基因表达水平检测抑制RBP4表达对成脂分化的作用。研究结果显示，RBP4重组慢病毒干扰载体构建成功，病毒滴度达到 6.5×107 pfu·mL-...
慢病毒介导的shRNA对MFC细胞生长抑素的沉默及对细胞增殖的影响
慢病毒介导 shRNA MFC细胞生长抑素 细胞增殖
<
2011/10/25
SS能够抑制肿瘤细胞的增殖，其与肿瘤的关系已成为肿瘤学的研究热点。本研究将包装获得的靶向生长抑素的lv-shRNA病毒液感染肿瘤细胞MFC，同时，以pcDNA3.1-SS（pSS）转染细胞组作为SS过表达细胞对照，通过荧光显微镜观察到了GFP的高效表达，RIA检测发现49.55%（P<0.05）的SS受到了抑制。MTT法绘制细胞的生长曲线可知，pSS转染细胞的生长明显受到抑制，抑制效率为8.14%...
慢病毒介导的shRNA对MFC细胞生长抑素的沉默及对细胞增殖的影响
极北鲵 东北小鲵 消化道 嗜银细胞
<
2011/8/25
SS能够抑制肿瘤细胞的增殖，其与肿瘤的关系已成为肿瘤学的研究热点。本研究将包装获得的靶向生长抑素的lv-shRNA病毒液感染肿瘤细胞MFC，同时，以pcDNA3.1-SS（pSS）转染细胞组作为SS过表达细胞对照，通过荧光显微镜观察到了GFP的高效表达，RIA检测发现49.55%（P<0.05）的SS受到了抑制。MTT法绘制细胞的生长曲线可知，pSS转染细胞的生长明显受到抑制，抑制效率为8.14%...
HIV-1慢病毒载体的发展及其生物安全性
HIV-1 慢病毒载体 生物安全性
<
2009/5/18
对HIV-1慢病毒载体的演变和发展做了较详细的介绍，并对慢病毒载体在生物安全性上的改进进行了综述。
慢病毒载体介导外源基因在不同细胞及鸡体不同组织中的表达
慢病毒载体 鸡原生殖细胞(cPGC) 转基因鸡 绿色荧光蛋白
<
2009/1/16
慢病毒载体介导外源基因在不同细胞及鸡体不同组织中的表达。
慢病毒载体介导成纤维细胞高效稳定表达绿色荧光蛋白
慢病毒载体 成纤维细胞 绿色荧光蛋白
<
2009/1/6
试验尝试建立稳定表达外源基因的人成纤维细胞系。取成年男性包皮皮肤的皮下组织，分离培养人皮肤成纤维细胞，分别采用脂质体和慢病毒载体介导转染人皮肤成纤维细胞表达绿色荧光蛋白。结果显示，来自成年人包皮皮下组织的成纤维细胞呈梭形，具有快速的增殖和稳定的生长性能。脂质体介导转染的人皮肤成纤维细胞绿色荧光蛋白表达不稳定，阳性细胞表达率低，转染后的人成纤维细胞变得更为细长，细胞生长速度降低。慢病毒载体介导人皮肤...