搜索结果: 1-15 共查到“作物学 基因转化”相关记录24条 . 查询时间(0.133 秒)
AAT基因转化杂交构树叶片组培筛选研究
杂交构树,载体构建,组织培养,AAT 基因,遗传转化
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2021/7/6
为了提高杂交构树的组培效率, 以蒺藜苜蓿为研究对象, 进行生物信息分析, 克隆蒺藜苜蓿目的基因AAT, 构建表达载体,通过农杆菌转化方法将目的载体转入杂交构树组培叶片中, 优化组培相关体系配比, 抗生 素筛选配比, RT-PCR 和定量 PCR 检验重组植株。结果表明: 最佳灭菌体系为75%乙醇消毒20 s, 0.3% HgCl2消毒15 min, 污染率低, 成活率高; 最佳愈伤期激素配比为6-...
选用内切酶SacⅠ和MluⅠ切割目标基因和载体,构建了携带-bar-基因的重组载体pBA002-GmAOC3,选用2个大豆品种(Jack和南农88-1)和2种外植体(子叶节和整个子叶节),研究大豆品种和外植体对根癌农杆菌介导的子叶节转化-GmAOC3-基因的影响。结果表明:外植体为整个子叶节的大豆品种Jack的出芽率和转化率最高,分别为79.5%和2.27%。经QuickStix PAT/bar-...
基因转化饲草玉米SAUMZ1提高抗寒性的研究
CBF1基因 转录因子 抗寒性 转化 饲草玉米SAUMZ1
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2013/8/2
本研究以拟南芥(Arabidopsis thaliana)叶片为材料,用PCR方法成功地克隆了转录因子CBF1基因,并初步对其进行了序列分析,构建了植物表达载体,然后通过农杆菌介导法将CBF1基因转入饲草玉米SAUMZ1(Zea mays)。PCR分子检测表明,外源基因已经插入到玉米草基因组中。不同低温胁迫处理后,转基因植株比对照植株的相对电导率含量低,进一步说明转入CBF1基因后增强了饲草玉米S...
农杆菌介导植酸酶基因转化大豆的研究
大豆胚尖 农杆菌 植酸酶基因
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2015/10/9
以大豆胚尖为受体,利用农杆菌介导法将来源于泡盛曲霉的植酸酶基因phy转入黑农37和吉林小粒豆中。此法取材方便,操作简单,产生嵌合体的可能性低。在筛选培养基中经草胺膦(1.0 mg·L-1)筛选,获得抗性植株。对获得的草胺磷抗性植株采用除草剂(10%Basta)筛查表型鉴定与目的基因、筛选标记基因PCR分子检测相结合的方法,检测结果直观、可信度高。最终获得5株阳性植株,转化率为0.5%。
草坪草外源功能基因转化研究进展
草坪草 转基因 功能基因
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2013/7/25
草坪草的转基因技术已经有了很大的发展,目前已经在多种草坪草上转入了抗除草剂、抗病虫、抗旱抗盐、抗寒抗热和延长绿期以及抗重金属等外源的功能基因,获得了抗逆性提高的转基因植株。综合分析认为,在抗逆机理研究的基础上选择更关键的抗逆基因进行遗传转化、转化草坪草矮化和养分高效吸收的基因、转基因技术与传统育种方法相结合以及转基因草坪草的安全性评价是将来需要重点展开的研究工作。
以“甘农1号”紫花苜蓿(Medicago sativa)7 d苗龄子叶和下胚轴为受体材料,建立了高效的苜蓿再生体系和遗传转化体系,筛选出MS+2,4D 2.0 mg/L+6BA 0.5 mg/L和MS+6BA 0.5 mg/L+NAA 0.03 mg/L+GA3 2.0 mg/L为苜蓿子叶愈伤组织诱导和分化的适宜培养基;探讨了农杆菌浓度OD600约0.5、感染时间8~10 min、共培养时间...
Ri质粒介导双价抗真菌病基因转化番茄的初步研究
转化植株 Ri质粒 双价抗真菌病基因 番茄
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2010/4/1
以番茄新品种T431、1911、0701为材料,以9天苗龄的叶片为受体,通过农杆菌Ri质粒介导,将几丁质酶基因和?-1,3葡聚糖酶基因转化番茄。共获得再生植株100株,经PCR技术检测,导入几丁质酶基因和?-1,3葡聚糖酶基因的植株分别为27株和13株,转化率为27% 和13%;两个目的基因同时导入的植株10株,转化率为10%。PCR-Southern检测呈阳性,表明外源基因已经整合到番茄基因组中...
本研究采用农杆菌介导的方法,将外源植酸酶(Phy)基因导入棉花品种的胚性愈伤组织中,经培养获得再生植株。PCR检测证明植酸酶基因已经插入到棉花基因组中,晋棉14和陕724的转化效率分别为33%和8.3%。此外,本研究还对影响农杆菌侵染棉花胚性愈伤转化效率的因素,如卡那霉素浓度、胚性愈伤组织生长状态、受体材料的基因型等进行了较为系统的比较研究,旨在建立一种转化效率高、稳定性好的棉花农杆菌遗传转化体系...
外源脱水应答转录因子CBF4基因转化玉米的获得
玉米 转基因 CBF4基因 抗旱
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2009/11/2
用PCR方法克隆了拟南芥脱水应答转录因子CBF4基因,以逆境诱导表达基因rd29A的启动子为驱动,构建了逆境诱导表达载体pBAC146。用基因枪转化法转化玉米优良自交系的幼胚和胚性愈伤组织,轰击后的愈伤组织经过筛选、分化和植株再生过程,共获得36棵转基因植株。经PCR、PCR-Southern和Southern检测表明,外源目的基因已成功整合到部分转基因玉米株系的基因组中。人工干旱处理下,抗旱生理...
农杆菌介导油菜油体基因与碱性成纤维细胞生长因子融合基因转化油菜研究
碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) 植物生物反应器 油体系统 根癌农杆菌 油菜
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2009/10/10
[目的]利用植物转基因技术,生产药用蛋白。[方法]以带柄子叶作为转化受体,利用根癌农杆菌介导法将油菜油体基因与bFGF的融合基因转入油菜中,在获得潮霉素(Hyg)抗性植株的同时,对油菜的再生条件进行优化,并对获得的抗性苗进行PCR和Southern检测。[结果]油菜最佳转化再生条件为外植体预培养2 d,共培养3 d,菌液浓度OD值为03,侵染时间5 min。[结论]该研究中,融合基因已成功整...
轮状病毒外壳抗原蛋白VP4 基因转化苎麻的研究
轮状病毒 VP4基因 苎麻
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2009/4/27
利用套叠PCR技术对轮状病毒外壳抗原蛋白VP4基因进行了定点突变,将改造后的基因插入pBI121构建植物表达载体。在
设计PCR引物时,引入植物表达载体pBI121具有的克隆位点BamH I和Sac I,利用BamH I和Sac I切除pBI121 上的GUS基因并使
载体质粒线性化,用同样的2种酶消化责TVP4克隆载体获得VP4基因片段,使之形成与线性化pBI121质粒相同的粘性末端。在T...
用分子生物学手段, 构建含番茄BADH2 基因的过表达载体, 通过农杆菌介导的方法将其导入日本晴幼胚诱导的愈伤组织, 获得
了303 块潮霉素( Hm) 抗性愈伤组织。获得1 059 个转化植株。随机选择115 个T0 植株进行Hyp 离体叶片筛选, 结果表明, 绝大多数植株均呈抗性, 并且与PCR 检测结果相吻合, 说明T0 植株中不存在假阳性。
该项研究在明确了蚕抗菌肽对水稻白叶枯病和细条病具有抑杀作用的基础上,将蚕抗菌肽B基因导入了水稻,获得了白叶枯病和细条病双抗转基因水稻植株。经对转基因第一、二代植株群体后代遗传分析,证明该基因导入水稻后能稳定遗传和表达。其主要技术内容:1.高效表达载体的构建。构建了一个由组成型启动子Actinl驱动和一个由叶片中特异性表达的rbcS启动子驱动的抗菌肽B基因表达载体。2.建立适宜水稻的基因枪转化条件(...
该成果以水稻为材料,在研究建立了高效的原生质体分离、细胞培养、组织培养以及植株再生技术的基础上,在中国首次比较了PEG介导法、基因枪法和农杆菌介导法三种基因转化方法在水稻基因转化中的效率、难易程度以及实用性等。结果表明,农杆菌法和基因枪法为较为理想的单子叶植物基因转化方法。农杆菌介导法将为单子叶作物基因转化提供一条有效途径。采用PIG基因枪法将苏云金杆菌蛋白基因(Bt,基因)和马铃薯蛋白酶抑制剂基...
基因枪在谷子外源基因转化中的技术研究
谷子基因 枪外源 基因转化
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2008/12/9
建立了以谷子松软愈伤组织为受体,钨粉浓度60-80mg/ml,质粒DNA每次加4-6微克,基因枪样品室高度6cm,轰击速度350-400米/秒,弹头前端点样,滤纸固定愈伤组织,轰击一次的谷子基因枪外源基因转化操作参数,国际先进。