搜索结果: 1-15 共查到“知识库 作物学 遗传转化”相关记录80条 . 查询时间(0.05 秒)
miRNA是一类在调控植物发育和生物及非生物逆境胁迫响应过程中发挥重要功能的非编码小RNA，为了探究miR395a在小麦抗病中的功能和作用机制，比较了不同物种中的miR395a成熟序列，分析发现miR395a在不同物种中具有较高的保守性，其中小麦与拟南芥、番茄以及大豆中的miR395a成熟序列具有高度一致性。并从小麦叶片中克隆了miR395a的前体序列，并将其连接到植物表达载体pCambia130...
利用萌动的成熟胚作外植体进行基因转化,可有效提高高粱转基因材料选育的效率。为了建立并完善以高粱萌动种胚作为外植体的遗传转化体系,本研究以高粱材料Is-623为转化受体,质粒pM3301UbiSpCP4为外源基因供体,采用农杆菌介导法进行遗传转化,并对转化的关键因素进行分析。结果表明,麦草畏(dicamba)诱导高粱萌动的成熟胚产生愈伤组织适宜浓度约为5 mg·L-1;农杆菌侵染时间为2 h时遗传转...
Brassinolide Enhanced Expression2（BEE2）基因属于bHLH转录因子家族，是调控油菜素内酯信号转导的上游调控因子。本研究通过RT-PCR技术克隆BpBEE2基因的全长cDNA序列，构建植物过表达及抑制表达载体，并通过农杆菌介导法进行白桦的遗传转化，对获得的转基因株系进行生长量及盐、旱胁迫分析，结果表明：获得了长度为1 080 bp的全长cDNA序列，成功构建了该基...
匍匐型地被菊再生及遗传转化体系的建立
匍匐型地被菊 高效再生 遗传转化体系 玻璃化
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2020/3/9
为构建有效的地被菊再生和遗传转化体系,本研究以匍匐型地被菊雨花落英叶片为外植体,研究不同苗龄和激素配比对叶盘再生的影响;通过农杆菌介导法将外源基因导入野生型植株中,研究预培养、延迟培养、抗生素浓度等遗传转化条件对转化效率的影响。结果表明,雨花落英叶盘转基因最适再生条件为,以苗龄为30 d的组培苗幼嫩叶片为外植体,设置再生培养基配方为MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.8 mg·L-1...
香菇Lentinula edodes是世界第二大食药用真菌，随着其全基因组测序的完成，功能基因组学研究也逐渐展开，建立稳定的香菇转化体系是目前的研究热点。本文将探索以农杆菌为介导的遗传转化体系在香菇中进行随机插入突变的转化效率以及稳定性。构建的质粒pYN6982以潮霉素抗性基因hyg作为筛选标记基因，以增强型荧光蛋白基因egfp作为报告基因，以农杆菌EHA105和LBA4404为介导，同时转化了孢...
细胞穿透肽介导的小黑麦小孢子遗传转化研究
小黑麦 小孢子 细胞穿透肽 转化
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2017/11/20
本研究选用小黑麦小孢子作为供试材料，进行细胞穿透肽介导的植物单倍体细胞遗传转化可行性研究。提取单核靠边期的小黑麦小孢子进行悬浮培养，将细胞穿透肽与报告基因GFP 的表达框复合物对小孢子进行转化。转化植株进行了PCR分子检测，并在荧光体视显微镜下观察外源GFP 基因的表达情况。共获得21 株候选转基因植株，其中染色体自然加倍植株为10 株。T1代加倍植株的PCR检测结果显示，加倍的转基因株系中有3 ...
紫花苜蓿MsLEA4-4基因的克隆、表达分析及遗传转化
紫花苜蓿 胚胎晚期富集蛋白(LEA) 逆境胁迫 遗传转化
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2018/2/5
胚胎晚期富集蛋白(LEA)广泛参与植物对多种逆境胁迫的反应。本研究利用同源克隆的方法,从紫花苜蓿中克隆了一个LEA4类基因的开放阅读框(ORF),命名为MsLEA4-4。该基因编码512个氨基酸,结构分析显示MsLEA4-4包含5个重复的由11个氨基酸TAQAAKEKTQQ组成的序列特征。利用实时荧光定量PCR检测了MsLEA4-4在不同逆境下的表达量,结果显示,该基因受干旱、NaCl、Cu2+、...
大豆翻译延伸因子GmEF1A干扰载体的构建及大豆遗传转化
大豆花叶病毒 GmeEF1A基因 RNAi GATEWAY技术 农杆菌介导大豆遗传转化
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2016/12/15
研究发现GmeEF1A与大豆花叶病毒的P3蛋白存在互作关系，并且参与SMV在大豆体内的繁殖。通过大豆GmeEF1A基因5个拷贝的核苷酸和氨基酸序列比对，确定其保守区间，克隆得到180 bp的干扰片段GmeEF1Ai。利用GATEWAY技术构建RNA干扰（RNA interference，RNAi）表达载体pB7GWIWG2(II)-eEF1Ai，并通过农杆菌介导的子叶节转化法导入到受体大豆品种天隆...
农杆菌介导超高产大豆子叶节遗传转化研究
超高产大豆 根癌农杆菌 子叶节 转化
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2015/11/13
为建立一个大豆子叶节高效遗传转化体系用于大豆基因工程育种，以超高产大豆品种为材料，子叶节为外植体进行了遗传转化，研究了农杆菌侵染的菌液浓度、侵染时间、共培养基中乙酰丁香酮浓度及共培养时间等影响农杆菌转化的因素。结果表明：适宜转化的侵染和共培养条件为侵染菌液浓度OD600=0.5，侵染时间30 min，共培养基含有乙酰丁香酮浓度200 μmol.L-1，共培养时间为3～4 d。并以此条件对不同基因型...
农杆菌介导大豆子叶节遗传转化体系的优化
大豆 子叶节 农杆菌中文 转基因体系优化
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2015/11/18
利用农杆菌菌株EHA105，对17个栽培大豆品种的大豆子叶节进行了侵染，从大豆基因型、氯气灭菌时间、外植体状态、菌株活力、侵染浓度、侵染时间、共培养时间等方面进行了优化。结果表明：氯气灭菌14～18 h，可在不影响大豆种子活力的同时最大限度的减少污染；暗处理1 d的外植体活力高于光照处理5～7 d的外植体；菌液浓度（OD600nm）在0.8～1.0且侵染浓度（OD600nm）为0.6～0.8时GU...
大豆科丰14子叶节遗传转化体系的优化
科丰14 子叶节 遗传转化
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2015/11/17
科丰14是一个适应性较广的大粒型大豆品种，以农杆菌介导的子叶节法为转化途径，研究农杆菌侵染时间、6-BA浓度及培养基中添加硫代硫酸钠对转化率的影响，以建立适宜科丰14的子叶节遗传转化体系。结果表明：当农杆菌侵染外植体时间为15 min、丛生芽培养基中6-BA的浓度为1.50 mg?L-1时产生的丛生芽率最高，可达72.92%；在共培养基中加入1 mmol?L-1的硫代硫酸钠能有效防止外植体褐化，提...
以河北省优良大豆品种冀豆15、五星2号和NF-58的子叶节为受体材料，利用农杆菌介导法进行遗传转化，探讨了影响农杆菌侵染后子叶节不定芽诱导的因素。结果表明：以萌发6 d、4℃处理24 h的子叶节为外植体，农杆菌侵染后经超声波处理30 s、共培养基中添加20 mg?L-1硝酸银，能够提高子叶节丛生芽诱导率，转化植株经草铵膦筛选以及PCR检测，T0代转化率达0.97%。利用该体系对大豆品种五星2号进行...
大豆遗传转化技术研究进展
大豆 遗传转化 研究进展
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2015/11/17
近年来，随着植物基因工程的快速发展，利用转基因技术进行大豆分子育种和基因功能研究成为一种重要手段。现阶段大豆转基因的研究重点主要集中在大豆遗传转化的方法和建立高效、稳定地遗传转化再生体系方面。本文对大豆遗传转化相关方法、转化再生体系及转化效率相关的因素进行了阐述，为大豆遗传转化及转基因新品种培育等相关研究提供参考。
大豆的真菌性病害已经成为了限制大豆产量增长及品质提高的主要原因，利用基因工程技术培育出具有广谱性抗病能力的大豆新品种，已成为目前提高大豆抗性的有效途径之一。本研究构建了含2种广谱抗病基因chi和hrpZpsta的双价植物表达载体，利用农杆菌介导技术导入大豆中，获得了能够在转录水平上表达2种外源抗病性基因的转基因大豆。对经抗性筛选得到的阳性苗及后代植株进行PCR检测、Southern杂交、荧光定量P...