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探究RNA干扰RhoBTB1基因表达对结肠癌HT29细胞增殖、凋亡的影响。方法：采用Lipofectamine 2000将siRNA RhoBTB1或siRNA NC转入HT29细胞中，实验分为Control组、转染对照组和siRNA Rho组，噻唑蓝（MTT）和流式细胞术分别检测细胞的的活力和凋亡率，蛋白质印迹法（Western Blot）检测细胞中RhoBTB1、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白...
RNA干扰在哺乳动物中的抗病毒免疫功能研究取得重要进展
RNA干扰 抗病毒免疫功能
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2017/9/7
RNA干扰（RNAi）是一种在真核生物中高度保守的转录后基因沉默机制, 被公认在真菌、 植物和无脊椎动物中起到关键的抗病毒免疫作用。尽管在哺乳动物中也存在RNAi，但哺乳动物的RNAi是否能起到抗病毒免疫作用仍存在较大争议。
日本血吸虫醛糖还原酶基因RNA干扰效应的初步研究
日本血吸虫 醛糖还原酶 RNA干扰
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2014/3/24
研究siRNA诱导的日本血吸虫醛糖还原酶（SjAR）基因转录本和蛋白水平的RNA干扰（RNAi）效应。 方法 设计并合成2条针对SjAR基因的siRNA（siRNA-1和siRNA-2）和1条阴性对照siRNA（siRNA-NC）。用日本血吸虫尾蚴感染4~6周龄雌性昆明鼠（800~1 000条/鼠），13 d后灌注小鼠肝门静脉收集童虫，每（120±10）条童虫为一组，分别采用电转法和浸泡法对各...
筛选泛醇-细胞色素c还原酶核心蛋白(Ubiquinol-cytochrome c reductase core protein 1，Uqcrc1)高效的RNA干扰片段，探讨Uqcrc1基因沉默对大鼠H9C2心肌细胞耐受缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation，H/R)损伤的影响。方法 制备三种针对Uqcrc1的RNA干扰片段，采用RT-PCR和Western blot检测Uqcrc1...
核干细胞因子RNA干扰慢病毒载体的构建及鉴定
核干细胞因子 慢病毒载体 白血病细胞
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2013/8/29
构建核干细胞因子基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒表达载体并对其在白血病细胞株中的干扰效果进行鉴定,为后期研究奠定基础。方法 针对核干细胞因子基因的序列设计RNAi有效靶点，合成含RNA干扰序列、Loop环、AgeⅠ和EcoRⅠ酶切位点，以及终止信号的单链DNA oligo，经退火形成双链DNA，与双酶切线性化的带有GFP荧光标记和嘌呤霉素抗性标记的GV248慢病毒...
RNA干扰PDCD4基因表达对巨噬细胞脂质沉积的影响
程序性细胞死亡4 RNA干扰 巨噬细胞 脂质
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2014/6/4
探讨程序性细胞死亡4（PDCD4）对巨噬细胞脂质沉积的影响及机制。方法 实验分为PDCD4 siRNA组和阴性对照siRNA组。用PDCD4 siRNA和阴性对照siRNA干扰小鼠腹腔巨噬细胞中PDCD4的表达，RT-PCR法和Western blotting法检测干扰效率；经ox-LDL刺激后，油红O染色检测巨噬细胞内油脂含量变化；Real-Time PCR法检测胆固醇流出相关基因肝X受体α（...
小RNA干扰蛋白酶体亚基α7抑制K562细胞增殖
蛋白酶体亚基α7 细胞周期蛋白 细胞增殖
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2014/2/18
运用小干扰RNA（siRNA）技术降低人髓性白血病细胞株K562细胞20S蛋白酶体亚基α7（PSMA7）基因的表达水平，探讨PSMA7表达下调对其细胞功能的影响。方法 采用HiPerFect将化学合成的针对人PSMA7基因的特异性siRNA转染入K562细胞后，用Western blot法检测siRNA对PSMA7蛋白表达的抑制效果，采用MTS法及细胞计数法检测细胞增殖速率，流式细胞术检测细胞周期...
目的利用慢病毒介导的RNA干扰技术下调CD133+HepG2肝癌干细胞中CD133的表达，探讨其对肝癌干细胞增殖及化疗敏感性的影响。方法利用流式分选技术筛选CD133+HepG2细胞并检测分选前后CD133表达量，体外成球及体内成瘤实验鉴定其“干性”；随后以CD133mRNA编码序列为干扰靶点，采用慢病毒介导的shRNA转染CD133+细胞。应用RT-PCR和Western Blot检测CD133...
丙型肝炎病毒核心蛋白抑制shRNA介导的RNA干扰作用
丙型肝炎病毒 核心蛋白 RNA干扰 抑制因子
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2012/7/10
研究丙型肝炎病毒编码的蛋白对RNA干扰的抑制作用，筛选出有作用的RNA干扰抑制因子。 方法 构建丙型肝炎病毒不同蛋白质的真核表达质粒，加入萤火虫荧光素酶基因的RNA干扰体系，共转染HeLa细胞，检测萤火虫荧光素酶活性以观察RNA干扰效果的变化，筛选出有作用的RNA干扰抑制因子。在针对内源性GFP的RNA干扰体系中进一步确证该种抑制作用。利用共转染方法观察该蛋白抑制RNA干扰的剂...
RNA干扰在氧化代谢酶功能研究中的应用进展
RNA干扰 细胞色素P450酶系统 脂氧合酶
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2013/10/29
RNA干扰(RNAi)是真核细胞内某些双链RNA能高效、特异地结合并降解互补mRNA,阻断其基因的表达,介导序列特异的基因沉默,导致细胞出现特定基因表达缺失的表型。RNAi技术作为抑制策略具有特异性、选择性和高效性等优点,被用于特异性的沉默细胞色素P450酶、脂氧合酶、环氧化酶和单胺氧化酶等氧化代谢酶的基因,探讨这些酶对内、外源化学物的生物转化作用及其与某些疾病发生、发展和治疗的关系,发现了一些代...
根据牛的成纤维细胞内生长因子5(Fibroblast growth factor 5, FGF5)基因cDNA序列设计引物, PCR扩增得到绵羊FGF5基因cDNA 的开放阅读框序列, 并比较和其他6种高等哺乳动物的序列同源性; 同时研究该基因在绵羊多种组织的表达情况, 以及研究以细胞模型RNA干扰下的表达情况。结果表明, 绵羊FGF5基因ORF全长为813 bp, 编码270个氨基酸, 分子量约...
设计、构建小鼠血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）特异的RNA干扰(RNA interference，RNAi)表达质粒，研究该质粒对小鼠结肠癌CT-26细胞VEGF表达的影响及对CT-26细胞生物学活性的影响，探索结肠癌基因治疗的新途径。方法 ① 筛选、设计、合成3段VEGF mRNA小干扰RNA（small interfere...
利用RNA干扰技术沉默p53基因突变子175H的效果评价
基因 p53 突变子 基因沉默
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2012/5/18
在p53基因缺失型细胞株H1299中转染p53基因突变子175H，构建H1299-175H细胞模型，并观察小发夹环RNA（shRNA）的基因沉默效果。方法：采用引物重叠PCR定点突变技术合成p53基因突变子175H，并利用基因重组技术构建出表达载体，以脂质体转染法建立细胞模型；合成针对p53-175H的shRNA并构建出反转录病毒表达载体Psuper-175HR，应用磷酸钙共沉淀法导入包装293T...
RNA干扰对老年性痴呆症的治疗机制研究
阿尔茨海默病 RNA干扰
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2009/10/28
Alzheimer’s disease is a neurodengenerative disorder disease with the progressive cognition malfunction and memory impairment. This article analyze the biochemical cause of Alzheimer’s disease and eva...