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通过建立PCV2亚临床感染模型，探究感染仔猪肺泡巨噬细胞中干扰素的变化及其调控，为PCV2复制和发病机制研究提供补充。30日龄猪圆环病毒2型（PCV2）和猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）抗原和抗体均为阴性的仔猪15头，随机分成PCV2阴性对照0 d组、PCV2感染14 d组和PCV2感染28 d组。感染后荧光定量PCR方法检测肺泡巨噬细胞中干扰素、模式识别受体和模式识别受体接头分子mRNA水平...
含有Th细胞表位的合成PCV2 ORF2 Cap多肽抗原的表达及免疫原性分析
PCV2 Th细胞表位多肽 Cap蛋白
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2015/12/30
拟测定在PCV2 ORF2 Cap P1多肽抗原中添加从PCV2 ORF1、ORF3中筛选的Th细胞表位多肽在促进其免疫原性中的作用，以及合成表达的PCV2 ORF2 Cap P1多肽抗原作为疫苗抗原的可行性。采用生物信息学及分子生物学方法，筛选获得1条泛宿主新型Th细胞表位多肽和3条PCV2特异的含有Th细胞抗原表位的多肽序列，然后将这4条Th细胞多肽氨基酸序列与筛选自ORF2 Cap1上的1条...
试验选取6头猪圆环病毒2型（PCV2）和猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）抗原、抗体均为阴性的30日龄断奶仔猪，无菌分离肺泡巨噬细胞（AMs），分4组进行体外培养：对照组、髓样分化因子88（MyD88）干扰组（干扰组）、PCV2感染组（PCV2组）、PCV2感染-MyD88干扰组（PCV2-干扰组）。采用小干扰RNA(siRNA)方法使MyD88基因沉默，并分别于培养后0、6、12、24和48 ...
为分析猪圆环病毒2型( PCV2) 与猪细小病毒 ( PPV) 体外共感染对猪外周血单个核细胞( PBMC) 细胞凋亡相关因子mRNA转录水平的影响，探讨PCV2和PPV共感染机制及宿主—病毒之间的作用关系，运用病毒滴度和相对荧光定量PCR技术，测定和分析PCV2和PPV感染PBMC后PCV2、PPV的病毒滴度含量及Bcl-2、FasL、p53、Caspase-8、PBR、TNF-α等的转录时相变...
PCV2·ORF2 基因片段在大肠杆菌中的表达与纯化
猪圆环病毒II型 ORF2 表达
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2009/5/18
目的]为了研究PCV2-ORF2基因片段在大肠杆菌中的表达与纯化。[方法]用PCR方法扩增PCV2 ORF2基因3忆端片段，PCR 产物经酶切后与经同样处理过的pET32a质粒连接，构建重组质粒。重组质粒经PCR和酶切鉴定并测序后，转化BL21感受态细胞；重组菌液用IPTG诱导表达，对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot 分析。[结果] ORF2基因在大肠杆菌中正确表达，表达的融...
PRRSV和PCV2共感染对猪肺泡巨噬细胞细胞因子IL-10、IL-12p40和IFN-γ mRNA转录的影响
猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪圆环病毒2型 共感染 肺泡巨噬细胞 细胞因子
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2008/4/22
用猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）和猪圆环病毒2型（PCV2）共感染40日龄健康仔猪，利用实时荧光定量PCR技术对共感染仔猪肺泡巨噬细胞（PAM）细胞因子IL-10、IL-12p40和IFN-γ的mRNA转录水平的变化进行了定量分析。结果表明，IL-12p40 mRNA 转录从3d开始显著上调（P<0.05），7d达高峰，14d开始下降但仍显著高于对照组，28d和42d低于对照组；IL-10 ...
PRRS-CSF-PCV2诊断DNA芯片构建研究
猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪瘟病毒 猪圆环病毒2型 DNA芯片 诊断
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2008/4/1
本研究旨在研制CSF-PRRS-PCV2诊断DNA芯片。根据各病毒序列选取靶标，制备相应探针，并构建DNA芯片。结果表明：该芯片能同时检测PRRS、CSF和PCV2感染，并能区分PRRSV欧洲型和美洲型毒株，芯片检测阳性判读标准为SNR≥1.5（信号总强度模式量化）或信号强度≥1 000（信号中位值模式量化）。该芯片具有特异性高、灵敏度高和可重复利用的优点。应用PRRS-CSF-PCV2诊断DNA...
PRRSV和PCV2共感染对猪肺泡巨噬细胞细胞因子IL-10、IL-12p40和IFN-γ mRNA转录的影响
猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪圆环病毒2型 共感染 肺泡巨噬细胞 细胞因子
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2013/12/27
用猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）和猪圆环病毒2型（PCV2）共感染40日龄健康仔猪，利用实时荧光定量PCR技术对共感染仔猪肺泡巨噬细胞（PAM）细胞因子IL-10、IL-12p40和IFN-γ的mRNA转录水平的变化进行了定量分析。结果表明，IL-12p40 mRNA 转录从3d开始显著上调（P<0.05），7d达高峰，14d开始下降但仍显著高于对照组，28d和42d低于对照组；IL-10 ...