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羊口疮病毒ORFV129锚蛋白在山羊睾丸细胞中的亚细胞定位
山羊 羊口疮病毒 ORFV129锚蛋白 生物信息学分析 真核表达 亚细胞定位
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2021/4/8
为明确羊口疮病毒ORFV129锚蛋白在细胞中的定位,参照GenBank中收录的ORFV SY 17全基因组(登录号:MG 712417.1)序列设计引物,扩增ORFV129基因完整编码框并测序鉴定,利用生物信息学软件分析该基因编码蛋白的氨基酸序列、蛋白跨膜区域,预测其亚细胞定位;并将ORFV129完整基因连接到真核表达载体pEGFP-N1,经双酶切鉴定及测序鉴定是否成功构建重组表达质粒pEGFP-...
克隆羊口疮病毒QH02株犗犚犉011基因并进行序列分析及原核表达、鉴定。方法 提取羊口 疮病毒QH02株的DNA,根据GenBank中(GU320351.1)的序列设计并合成引物,PCR扩增犗犚犉011基 因。将测序正确的序列用生物信息学软件对其基因及蛋白的结构进行预测,并将基因构建至pET32a(+) 原核表达载体,转化至大肠埃希菌BL21(DE3),挑取阳性克隆测序正确后用异丙基βD硫...
羊口疮病毒F1L、B2L基因重组腺病毒构建及对小鼠的免疫效果分析
羊口疮病毒 重组腺病毒 构建 免疫效果
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2019/1/15
选取自剪切T2A和P2A肽,连接F1L和B2L基因,构建羊口疮病毒(orf virus,ORFV)重组腺病毒,并对其免疫效果进行评价,为羊口疮的疫苗研制提供依据。应用PCR扩增ORFV-F416毒株的F1L、B2L目的基因,构建重组腺病毒穿梭质粒,穿梭质粒与骨架质粒共转染HEK-293细胞,包装出ORFV重组腺病毒。将重组腺病毒感染MDBK细胞,收集上清液免疫ICR小鼠,并进行间接ELISA、淋巴...
羊口疮病毒ORF125基因编码蛋白的结构预测及其在真核表达质粒转染细胞中的定位
羊口疮病毒 ORF125序列分析 亚细胞定位 基因结构
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2014/9/26
旨在预测羊口疮病毒(ORFV)ORF125蛋白结构及其在真核表达质粒转染细胞中的定位。设计引物PCR扩增ORF125基因,并将其定向克隆至pEGFP-N1真核表达载体,经酶切鉴定及序列测定后得到阳性重组表达质粒pEGFP-ORF125。利用DNAStar和MEGA4.0元件分析不同毒株间ORF125基因的遗传进化关系,接着通过在线Expasy工具预测其二级结构并与Bcl-2家族成员进行比较。利用脂...