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基于H蛋白表位合成肽的小反刍兽疫病毒抗体间接ELISA检测方法的建立
小反刍兽疫病毒 H蛋白 B细胞表位 iELISA
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2021/3/8
本研究旨在建立针对小反刍兽疫病毒（peste des petits ruminants virus，PPRV）H蛋白抗体的iELISA检测方法。以筛选的H蛋白B细胞表位为基础，选择反应原性较好的4个抗原表位肽串联后合成作为包被抗原，优化各步反应条件及筛选各种缓冲液，并确定检测临界值。经优化后，多表位抗原肽的最佳包被量为1.5×10-6 μg·孔-1，血清临界稀释度为1：100，酶标二抗最佳稀释度为...
小反刍兽疫病毒疫苗毒株N75-1感染细胞源外泌体对山羊SLAM表达的影响
外泌体 小反刍兽疫病毒 山羊PBMCs 淋巴细胞信号活化分子
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2021/3/11
淋巴细胞信号活化分子（SLAM）是小反刍兽疫病毒（PPRV）在淋巴细胞的主要受体。本研究旨在探索PPRV感染细胞源外泌体对山羊SLAM表达的影响。通过荧光定量PCR法、流式细胞术和Western blot技术检测PPRV疫苗毒株N75-1感染山羊外周血单核细胞（PBMCs）源外泌体（Exo-PPRV）共育对接纳细胞（正常山羊PBMCs）中SLAM表达水平和细胞因子分泌水平的影响。结果表明，与正常细...
PPRV属副黏病毒科麻疹病毒属,主要感染小反刍动物，特别是山羊较为易感，易感羊群发病率通常达 60%以上，病死率高达 50%以上。主要结构蛋白包含有蛋白N、P、M、F、H、L蛋白，病毒H蛋白与细胞膜上受体蛋白相结合，启动病毒侵入细胞，是引起细胞病变(CPE) 的决定因素。
全球清除小反刍兽疫病毒计划启动（图）
全球 清除小反刍 兽疫病毒计划
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2015/4/8
日前在科特迪瓦首都阿比让举行的动物卫生专家会议一致同意，尝试在全球消除小反刍兽疫病毒（PPR）。这是一种在非洲、中东和亚洲杀死大批山羊和绵羊的病毒性疾病，但防控措施一直不得力。在联合国粮农组织（FAO）和世界动物卫生组织（OIE）共同举办的旨在启动一项全球性清除计划的会议上，FAO总干事José Graziano da Silva表示，“进一步采取更大胆举措”的时候到了。
利用化学合成的小反刍兽疫病毒（PPRV）表位多肽免疫小鼠，以期了解表位多肽的免疫效果。首先利用表位预测软件筛选针对PPRV F和H基因的4条表位多肽，并进行化学合成。将合成多肽免疫小鼠，通过ELISA、MTT法、NK细胞杀伤活性测定及T细胞亚群检测等免疫试验分析预测表位的抗原性。结果表明：在筛选的4条表位多肽中，H242-255、F528-541和 H349-362具有较好的体液免疫功能；H242...
小反刍兽疫病毒H基因在杆状病毒中的表达及其免疫原性研究
小反刍兽疫病毒 H蛋白 杆状病毒表达系统 免疫性检测
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2014/7/22
为表达小反刍兽疫病毒（PPRV）H蛋白，并探讨其免疫原性，通过RT-PCR克隆PPRV Nigeria75/1毒株H基因，将其克隆至供体质粒pFB-LIC-Bse中，测序验证后将重组质粒pFB-LIC-Bse-PPRV-H转化至DH10Bac感受态细胞中，经同源重组获得重组杆状病毒穿梭质粒bacmid-PPRV-H，将其转染昆虫细胞sf21获得含有PPRV H基因的重组杆状病毒。采用SDS-PAG...
旨在利用免疫共沉淀技术验证小反刍兽疫病毒血凝素蛋白和受体蛋白SLAM间的相互作用。鉴于截短的H蛋白仍具有正常的与细胞受体结合的能力，分别构建pcDNA3.1-tH真核表达载体和SLAM及其缺失突变体（m1-胞外区、m2-无信号肽胞外区、m3-胞外区N端29-136位氨基酸和m4-胞外区C端137－240位氨基酸）编码基因的pEGFP-N1系列真核表达载体，将测序正确的重组质粒共转染中国仓鼠卵巢细胞...
间接ELISA和竞争ELISA检测小反刍兽疫病毒抗体的比较
小反刍兽疫病毒 N蛋白 间接ELISA 竞争ELISA
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2014/3/31
旨在比较检测小反刍兽疫抗体的间接ELISA和竞争ELISA方法，通过诱导表达小反刍兽疫病毒（PPRV）N蛋白，并以此作为包被抗原，检测94份绵羊和25份山羊血清样本。结果显示间接ELISA与标准竞争ELISA试剂盒的符合率为74.8%，竞争ELISA与标准竞争ELISA试剂盒的符合率为96.6%。竞争ELISA比间接ELISA方法检测结果可信度高，适于临床推广应用。
本研究旨在构建小反刍兽疫病毒(PPRV)的辅助质粒和微型基因组并验证其功能，为建立PPRV反向遗传操作平台奠定基础。首先构建表达PPRV分离株China/Tib/07的N、P和L蛋白的辅助质粒pCIN、pCIP和pCIL。通过间接免疫荧光试验验证3个辅助质粒转染细胞后的蛋白表达情况，并从mRNA水平上验证蛋白表达的正确性；扩增PPRV基因组两末端序列和eGFP报告基因，三者通过overlap...