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搜索结果: 1-8 共查到兽医科学基础学科 体细胞核移植相关记录8条 . 查询时间(0.493 秒)
本研究旨在对梅花鹿-牛异种体细胞核移植(Interspecies somatic cell nuclear transfer,ISCNT)的显微操作方法进行系统研究,从而优化其操作过程。以梅花鹿耳皮肤成纤维细胞为供核细胞,牛MⅡ期卵母细胞为受体,分别采用盲吸法、挤压法和脱羰秋水仙碱(Demecoline,DEME)化学辅助的方法去核,带下注射(Perivitelline microinjectio...
通过对猪体细胞核移植中电融合及联合化学激活对猪重构胚发育能力进行探讨,为广西巴马小型猪的手工克隆搭建平台。利用手工克隆(HMC)技术对猪体细胞核移植胚胎采用不同的电融合方法和融合后化学激活不同时间,研究猪手工克隆胚胎的发育能力。结果表明:(1) 对重构胚进行一步法电融合时,参数2(180 V· mm-1,30 μs×1次)与参数1(160·mm-1,30 μs×1次)两组间的融合率差异显著 (65...
本研究通过脂质体介导的方法将来源于线虫C. Briggsae的ω-3脂肪酸去饱和酶基因(sFat-1)转染至大白猪胎儿成纤维细胞。采用600 μg·mL-1 G418药物浓度,经连续10 d筛选及PCR、RT-PCR鉴定,获得11个转基因阳性细胞克隆。以体外成熟42 h的猪卵母细胞与转基因细胞构建重构胚。经体外培养后观察,转基因克隆胚胎与非转基因胚胎的卵裂率 (76.6%±4.1% vs. 81....
本研究旨在比较水牛2种体细胞核移植(Somatic Cell Nuclear Transfer, SCNT)方法的效果以及激活前的时间间隔对全细胞胞质内注射法(WholeCell Intracytoplasmic Microinjection, WCICSI)核移植效果的影响。采用水牛胎儿成纤维细胞作为供核,比较了透明带下注核法(Perivitelline Microinjection, PM)...
取成年小鼠唇部皮肤进行培养, 分离成纤维细胞并血清饥饿培养1周, 用作核供体。对成年小鼠进行超排, 取卵母细胞用作核受体,核移植重构胚经SrCl2激活处理6 h后, 同mM16培养液和小鼠输卵管上皮细胞共培养, 把发育到早期囊胚的重构胚转移至小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上, 添加ES细胞条件培养液,消化分离ICM, 然后接种培养, 对孵出的ES细胞样集落进行鉴定培养。结果显示, 小鼠唇部皮肤成纤维细胞...
水牛体细胞核移植方法的研究     水牛  体细胞  核移植  电融合       < 2013/12/11
探讨电融合参数对水牛体细胞核移植效果的影响。体外成熟培养22~24 h的水牛卵母细胞,在含有5 μg/mL细胞松弛素的操作液中进行去核,然后将经0.1 mg/L Aphidicolin (APD)处理1 d, 再用0.5% FBS培养2~9 d的水牛耳皮成纤维细胞或颗粒细胞注射到去核的卵母细胞卵周隙中,再经电融合形成重构胚。重构胚经5 μmol/L离子霉素激活处理5 min并在2 mmol/L的6...
取成年小鼠唇部皮肤进行培养, 分离成纤维细胞并血清饥饿培养1周, 用作核供体。对成年小鼠进行超排, 取卵母细胞用作核受体,核移植重构胚经SrCl2激活处理6 h后, 同mM16培养液和小鼠输卵管上皮细胞共培养, 把发育到早期囊胚的重构胚转移至小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上, 添加ES细胞条件培养液,消化分离ICM, 然后接种培养, 对孵出的ES细胞样集落进行鉴定培养。结果显示, 小鼠唇部皮肤成纤维细胞...
研究牛皮肤成纤维细胞的处理方式对卵质内直接注射法构建的核移植胚胎发育的影响,同时比较了MⅡ期与TⅡ期卵母细胞作为受体的效果。结果表明:在细胞核注射前对供体细胞作低渗处理可明显提高胚胎构建的成功率和早期发育能力。牛皮肤成纤维细胞是否作G1/G0期同期化处理,对核移植胚胎的发育没有明显的影响。发现供核细胞在悬浮情况下作休眠处理,所得核移植胚胎的发育能力与贴附休眠的细胞基本相同,且悬浮休眠3 d后的细胞...

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