搜索结果: 1-7 共查到“人类学 人胰岛素”相关记录7条 . 查询时间(0.29 秒)
用改进的寡核苷酸诱导突变法改造人胰岛素前体基因
寡聚核苷酸 突变 人胰岛素前体的C肽
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2008/1/4
摘要 我们用改进了的寡聚核苷酸诱导突变法,将两个单一限制性内切酶位点引入人胰岛素前体B链与C链连接处附近,及C链与A铁连接处附近。用含U模板法将B链第30个残基密码子ACC改成ACG,从而引入MluⅠ位点。用修改了的缺口双链DNA突变法,将A链第4个残基密码于GAG改成CTG,引入了一个PstⅠ位点。突变效率的为17％-36％。这个突变体在人胰岛素前体结构及蛋白质折叠的研究中,将有利于更换不同的C...
摘要 为获得ＩＧＦ－Ⅱ的高效表达，构建了其多拷贝、分泌型表达载体：含有５个串联的ＩＧＦ－Ⅱ表达单元；由受甲醇诱导的醇氧化酶启动子控制表达；利用啤酒酵母α因子的前导肽引导分泌．线形化表达载体转化Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ蛋白酶缺陷型菌株后，筛选到有ＩＧＦ－Ⅱ表达和分泌的阳性转化子；进一步优化表达、培养条件后，ＩＧＦ－Ⅱ在高密度发酵上清中的产量可达６０ ｍ ｇ／Ｌ．对Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ产生的ｒｈＩＧＦ－Ⅱ...
Met-Lys-双C肽人胰岛素原基因的构建表达及分离纯化
Met-Lys-双C肽人胰岛素原 人胰岛素 E-coli 分离纯化
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2007/12/19
摘要 应用 Ｐ Ｃ Ｒ 定点突变方法构建编码 Ｍ ｅｔ Ｌｙｓ双 Ｃ 肽人胰岛素原基因，并在大肠杆菌中以包含体方式获得表达 表达产物经还原、重组、 Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ７５ 分离纯化，获得 Ｍ ｅｔ Ｌｙｓ双 Ｃ 肽人胰岛素原，经胰蛋白酶与羧肽酶 Ｂ的酶解， Ｒｅｓｏｕｒｃｅ Ｔ Ｍ Ｑ 阴离子交换柱层析分离制备得人胰岛素，其放免活性、受体结合活性均与猪胰岛素相同
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摘要 为了利用基因工程生产胰岛素，按照已知的人胰岛素Ａ、Ｂ链氨基酸序列和大肠杆菌偏爱的氨基酸密码子设计并合成了人胰岛素原类似物（ＢＫＲＡ）基因，其中以赖（Ｋ）－精（Ｒ）二肽编码区取代人胰岛素原Ｃ肽编码区．为了避免其编码蛋白在大肠杆菌中表达时被降解，通过人工接头将２个ＢＫＲＡ基因串联起来，接头部分氨基酸序列为Ａｒｇ－Ａｒｇ－Ａｓｎ－Ｓｅｒ．将串联的ＢＫＲＡ基因克隆到表达载体ｐＥＴ－２８ａ（＋），实现...
摘要 我们研究了外源基因——合成的人胰岛素原基因在酵母α因子系统中的表达和分泌。用表达载体YTI-15转化酵母63号株可得到每升约2毫克的人胰岛素原分泌产物。
用富集文库克隆人胰岛素基因组基因
基因文库 人胰岛素基因 序列分析
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2007/12/18
摘要 通过构建可富集人胰岛素基因的λ噬菌体文库，克隆了人胰岛素基因组基因．首先从中国人血液白细胞中提取到人基因组ＤＮＡ，用ＥｃｏＲⅠ和ＢｇｌⅡ对基因组ＤＮＡ进行全酶切，经０．４％琼脂糖凝胶电泳，特异回收９．５ｋｂ左右的ＤＮＡ片段．将该片段与λＥＭＢＬ３／ＢａｍＨⅠ臂连接，构建成一个特殊的人基因组λ噬菌体文库（富集文库），效价为２×１０４．同时采用ＰＣＲ方法及用引物Ⅰ：５′ＧＧＡＣＡＧＧＣＴＡＣＡＴ...
从基因工程小C肽人胰岛素原类似物(B-R2-A)制备人胰岛素
小Ｃ肽人胰岛素原类似物 Ｅ．ｃｏｌｉ 人胰岛素 分离纯化
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2007/12/17
摘要 以融合蛋白的形式，在Ｅ．ｃｏｌｉ中经温度诱导表达了小Ｃ肽人胰岛素原类似物（Ｂ－Ｒ２－Ａ）．表达的融合蛋白可占细胞总蛋白６８％．经磺酸解，及初步分离Ｓ－磺酸型融合蛋白，再经ＣＮＢｒ裂解后，进行还原重组，ＨＰＬＣ分离纯化等步骤，每升发酵液可得到Ｂ－Ｒ２－Ａ约５０ｍｇ。经酶促转化及ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－２５纯化，得重组人胰岛素约２０ｍｇ，其氨基酸组成与人胰岛素相同，并具有与猪胰岛素相同的生...