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搜索结果: 1-15 共查到犬瘟热病毒相关记录20条 . 查询时间(0.239 秒)
犬瘟热是一种接触性传染病,可侵害免疫系统、呼吸系统、消化系统,甚至神经系统,导致全身性的病理变化,对宠物犬、毛皮动物等存在巨大威胁。目前常用的胶体金检测法不能有效区分疫苗免疫与动物自然感染。为建立一种高效准确的鉴别犬瘟热病毒野毒株和疫苗株的检测方法,本试验对从武汉地区收集已确诊犬瘟热的6只犬分离得到的野毒株以及3株广泛使用的CDV疫苗株进行全基因组测序,从氨基酸水平和碱基水平比对分析后,确定H基因...
旨在构建稳定表达SLAM受体的SLAM-Vero细胞系和SLAM-BHK21细胞系,并比较其对犬瘟热病毒(CDV)野毒株的敏感性,为CDV野毒株的快速分离与研究提供一种有效的工具。将真核表达载体Pcag-SLAM分别转染Vero细胞和BHK21细胞。经G418压力筛选结合有限稀释法筛选阳性克隆株,并通过RT-PCR、间接免疫荧光鉴定(IFA)和Western blot等方法对稳定表达SLAM受体的...
据悉,CDV可感染犬科和鼬科的多种肉食动物,造成宿主强烈免疫抑制和较高死亡率。近年来,随着我国毛皮动物养殖业的快速发展,犬瘟热一直是我国毛皮动物养殖业的“头号杀手”。为建立CDV对狐狸、貉和水貂的致病动物模型用于犬瘟热疫苗和抗病毒药物评价以及病毒与宿主相互作用研究。该研究通过CDV人工感染该3种易感动物,创新性地建立了评价病毒毒力和宿主免疫抑制的相关指标并对感染动物进行实时监测研究。试验结果表明C...
近日,从中国农业科学院特产研究所获悉,该所特种动物病原与免疫创新团队研制出犬瘟热病毒单链抗体,相关研究成果发表在最新一期的国际专业学术期刊《单克隆抗体的免疫诊断和免疫治疗(Monoclonal Antibodies in Immunodiagnosis and Immunotherapy)》上。
为表达具有天然构象的犬瘟热病毒(CDV)囊膜糖蛋白融合蛋白(F)和血凝素蛋白(H),本研究扩增小熊猫源CDV驯化致弱株LP的F、H基因,克隆至pFastBacTM1载体中,测序验证后转化至DH10BacTM感受态细胞,同源重组获得穿梭质粒rBacmid-F、rBacmid-H,将其分别转染Sf9细胞获得重组杆状病毒rpFB-F、rpFB-H,并将表达的重组融合蛋白(rF)和血凝素蛋白(rH)进行I...
为探讨犬瘟热病毒受体——信号淋巴细胞激活因子(SLAM)的细胞定位、在水貂组织中的分布及病毒感染对受体表达水平的影响,本研究采用间接免疫荧光法(IFA)进行了SLAM细胞定位。以IFA检测感染水貂肝、脾、肺、肾、脑组织的犬瘟热病毒抗原,以半定量PCR和间接免疫组化法(IHA) 检测健康水貂及感染水貂SLAM在以上组织中的分布。结果表明,在Vero-SLAM细胞膜及细胞质内可见SLAM特异性荧光;感...
犬瘟热病毒(Canine distemper virus, CDV)核衣壳蛋白基因(Nucleocapsid protein, N)的N蛋白基 因克隆到pMD-18T载体,经酶切分析测序获得阳性重组质粒。采用EcoRⅠ和KpnⅠ双酶切后定向克隆 进真核表达载体pcDNA中,电泳测序筛选阳性克隆pcDNA-N,转染COS-7细胞,IFA验证结果显示转染 的COS-7细胞胞浆中表达了CDV的N...
信号淋巴激活分子(SLAM)为犬瘟热病毒(CDV) 感染其宿主动物识别的细胞受体。本试验应用RT -PCR 从狐狸、貉和水貂的外周血淋巴细胞中克隆到其相应SLAM 基因。基因测序比较发现,狐狸、貉与同科的犬SLAM 基因编码区长度均为1 029 bp,核苷酸同源性高于98.6% ;而水貂SLAM 基因编码区长度为1 020 bp,与以上三种动物遗传关系较远(核苷酸同源性< 83.7%),但与海豹S...
[目的]建立利用单克隆抗体检测犬瘟热病毒的直接免疫荧光诊断方法。[方法]通过搅拌法,用异硫氰酸荧光素标记G蛋白纯化的抗犬瘟热病毒单抗CE3,对荧光抗体进行纯化、鉴定,并确定其最适工作浓度。对61份临床可疑犬瘟热病料进行直接免疫荧光检测。[结果]吸收试验、阻断试验和特异性试验结果显示,标记抗体具有高度的敏感性和特异性,与犬细小病毒(CPV)、犬副流感病毒(CPIV)、犬腺病毒(CAV)、狂犬病毒(R...
[ 目的] 获得犬瘟热病毒F 蛋白特异性单克隆抗体。[ 方法] 用纯化的大肠杆菌BL21 表达的犬瘟热病毒重组F 蛋白作为抗原, 免 疫BALB/ c 小鼠, 采用传统的杂交瘤技术制备单克隆抗体。用ELISA、IFA、Western- blot 、细胞中和试验鉴定各株单抗的生物学特性。[ 结果] 获得7 株稳定分泌犬瘟热F 蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株( 2D6 , 3E10 ,3A2 ,5B7...
[ 目的] 筛选出稳定分泌抗犬瘟热病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株。[ 方法] 用纯化的犬瘟热病毒( CDV) 抗原免疫BALB/ c 小鼠, 取脾细胞与SP2/ 0 骨髓瘤细胞融合, 经间接ELISA 和有限稀释法克隆杂交瘤细胞。研究了杂交瘤细胞的稳定性和染色体数, 测定了单克 隆抗体的效价并鉴定其特异性和亚型。[ 结果] 经反复筛选和亚克隆后, 共获得3 株能稳定分泌抗CDV 单克隆抗体的杂...
为提高犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)重组质粒的免疫应答水平,合成4条CpG寡脱氧核苷酸(CpG-oligodeoxynueleotides,CpG-ODN);通过体外淋巴细胞增殖试验确定1条刺激活性最显著的CpGODN,序列为5′TCGTCGTTTTGTCGTTTTGTCGTT-3′。将30只健康毕格犬随机均分为2大组,每大组再分为5小组,分别以不同的剂量...
貂、狐、貉源犬瘟热病毒分离株H和N基因的遗传多样性分析。
根据GenBank发表的犬瘟热病毒N基因全序列,设计合成了1对特异扩增CDV N基因的引物。以山东泰安分离的CDV-FOX-TA株细胞毒中提取病毒RNA来制模板,利用RT-PCR扩增出了1.6kb的N基因,将其克隆到pIREShyg载体上,构建了pIRES-N真核表达载体。然后通过磷酸钙共沉淀法转染CHO-K1细胞,通过潮霉素筛选得到阳性克隆,间接免疫荧光实验(IFA)鉴定N基因在CHO细胞中的表...
以构建的真核表达载体pVAXLPH、pVAXLPF和pVAXLPN为基因疫苗,分组进行了免疫小鼠试验,对免疫鼠体内免疫应答水平进行了检测。结果显示: 所构建的基因疫苗可以诱导小鼠产生特异性免疫应答反应,pVAXLPH+pVAXLPF+pVAXLPN 3个基因混合免疫小鼠诱导产生了较强的体液免疫和细胞免疫应答,免疫3次后血清中抗CDV ELISA抗体效价为0.332,而免疫前为0.158;抗CDV中...

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