搜索结果: 1-15 共查到“酶学性质”相关记录70条 . 查询时间(0.264 秒)
来源于解酯菌的嗜热耐碱脂肪酶的表达纯化及其酶学性质研究
解酯菌 脂肪酶 酶学性质 油酸乙酯
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2020/6/15
脂肪酶广泛应用于食品加工、生物柴油制备等领域。为了有效提高微生物脂肪酶的可利用度,将来源于解酯嗜热菌(Thermosyntropha lipolytica DSM 11003)的脂肪酶基因(tll2)克隆到大肠杆菌表达载体pET28a中,获得重组质粒pET28a-TLL2,将pET28a-TLL2转入大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌中进行高效表达。通过热处理和镍柱亲和层析得到电泳纯的蛋白TlLip...
为筛选具有工业应用价值的产蛋白酶新菌种,本研究采用酪素培养基进行新菌株筛选,利用生理生化试验和16S rDNA测序进行菌种鉴定,并结合生化方法测定其蛋白酶的酶活。结果表明,本研究筛选的一株产蛋白酶菌株HSU-2 (GenBank登录号:MN315516)为蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)。该菌种产蛋白酶的最适pH值和温度分别是7.0和60℃,为一种耐高温的中性蛋白酶。该蛋白酶可耐受5...
【目的】谷氧还蛋白(glutaredoxin, Grx)是生物体内依赖硫醇的抗氧化酶，在生物氧化胁迫和细胞凋亡等许多重要的生命活动中发挥作用。本研究旨在测定甜菜夜蛾Spodoptera exigua谷氧还蛋白家族成员SeGrx1的基因序列以及酶催化反应特性，为揭示其在昆虫体内功能奠定基础。【方法】以前期获得的甜菜夜蛾转录组数据为基础，采用RACE-PCR技术克隆甜菜夜蛾Grx1基因cDNA全长序列...
本试验旨在克隆植物乳杆菌DPP8胆盐水解酶（BSH）基因并在大肠杆菌表达系统对其进行表达，同时探讨其酶学性质。通过PCR技术克隆植物乳杆菌DPP8 BSH基因，然后将该基因重组到大肠杆菌表达载体pET32a（+）中，获得重组表达载体pET32a（+）-BSH，再将其转化至大肠杆菌BL21中，通过异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达BSH。采用牛磺酸标准液标定法对表达的BSH的活性进行测定，并对其...
以中国鲎为材料，自内脏中提取几丁质酶（EC3.2.1.14），研究其酶学性质。结果表明，中国鲎几丁质酶的最适pH为5.4，最适温度为55 ℃；酶在pH 4.6～6.0区域较为稳定，在20～60 ℃内具有较好的热稳定性。以胶体几丁质为底物测得中国鲎几丁质酶的米氏常数为2.175 mg/mL，最大反应速度为1.456 μmol/(mL·min)。金属离子Li+、Na+、K+、Mg2+和Fe2+对几丁质...
【目的】本文在前期获得绿盲蝽Apolygus lucorum磷脂酶C基因(AlPLC)的基础上，明晰AlPLC基因在绿盲蝽不同日龄若虫中的表达特征，阐明AlPLC重组蛋白的酶学性质。【方法】qRT-PCR法分析1-13日龄绿盲蝽若虫AlPLC的表达量；构建含有AlPLC基因的原核表达载体pCzn1-AlPLC；进一步将该表达载体经IPTG诱导表达和蛋白纯化，获得具有磷脂酶活性的重组蛋白；以p-NP...
美国白蛾几丁质脱乙酰酶的克隆、表达及酶学性质
美国白蛾 几丁质脱乙酰酶 克隆表达 酶学性质
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2017/11/17
研究美国白蛾（Hyphantria cunea）几丁质脱乙酰酶（chitin deacetylase，CDA）基因的酶学性质，了解其在昆虫生命过程中如何发挥功能，为美国白蛾的生物防治提供新靶标。【方法】对家蚕（Bombyx mori）、棉铃虫（Helicoverpa armigera）和云杉卷夜蛾（Choristoneura fumiferana）3种鳞翅目昆虫的几丁质脱乙酰酶2序列保守域进行分析...
大肠杆菌重组几丁质酶的表达、包涵体复性及酶学性质研究
几丁质酶 重组蛋白 包涵体 复性
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2016/5/23
通过研究重组几丁质酶在大肠杆菌表达系统中诱导表达的浓度、时间和温度，获得表达的最佳条件。表达产 物除了可溶性目的蛋白以外，仍存在于包滋体中。采用透析复性和（i-(TA亲和层析柱上复性两种方法对包滋体中的 目的蛋白进行复性，并比较对目的蛋白产率和比酶活的影响。并考察了亲和层析柱上复性时的上样量、洗脱速率和温 度对酶活的影响。结果发现，表达的几丁质酶可以采用透析和亲和层析柱上复性，亲和层析柱上复性的比...
产β-葡萄糖苷酶酿酒酵母菌株紫外诱变选育及酶学性质分析
酿酒酵母 紫外诱变 筛选 突变体
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2016/5/27
为了得到高产胞外β-葡萄糖苷酶的酿酒酵母(Saccharomycaes cerevisiae)菌株,采用紫外线诱变技术对菌株MQFSM-3进行处理,研究了紫外诱变条件对菌株致死率的影响,并对突变菌株酶活及酶学性质进行评价。结果表明,出发菌株在辐照剂量为3500μJ/cm2的紫外灯下照射9 min,致死率为81.09%;通过初筛、复筛及多次传代培养,突变菌株UV-45产酶稳定,酶活提高41.64%,...
一株产壳聚糖酶海洋真菌MF-08的分离鉴定及酶学性质研究
海洋真菌MF-08 壳聚糖酶 26S rDNA
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2016/5/23
从实验室保存的海洋产壳聚糖酶真菌中分离纯化出一株产壳聚糖酶活性较高的菌株，命名为MF-08。通过
26S rDNA序列分析并结合形态学鉴定，将海洋真菌MF-08归为黄曲霉群。壳聚糖酶的最适作用温度为40 !;最适反
应pH为5.2;酶活在PH4.0~6.0和小于40 !范围内相对稳定;Cu2+、Fe3+和Hg2;对壳聚糖酶活性有明显的抑制作用c
重组鱼腥藻脂肪氧合酶定点突变及突变酶酶学性质研究
脂肪氧合酶 定点突变 酶学性质
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2016/6/28
重组鱼腥藻脂肪氧合酶(Ana-LOX)基因来自于Anabaena sp.PCC 7120。利用定点突变技术将Ana-LOX的421位和40位的缬氨酸(Val)突变为丙氨酸(Ala),获得突变体V421A、V40A和V421A/V40A。野生型Ana-LOX在50℃下半衰期为3.8 min。而突变酶V421A和V40A在50℃的半衰期分别为4.4 min和7.0 min。突变酶V421A/V40A的...
米曲霉As-W6脂肪酶的分离纯化及酶学性质研究
米曲霉 脂肪酶 分离纯化 酶学性质
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2016/6/28
米曲霉As-W6的脂肪酶发酵上清液经硫酸铵分级沉淀、透析、DEAE-52纤维素离子交换层析和Sephadex G-75葡聚糖凝胶过滤层析纯化后得到电泳纯的脂肪酶,纯化倍数为86.7倍,回收率为23.2%,相对分子质量为40.8 ku,酶学性质研究结果表明,该脂肪酶最适反应温度和最适p H分别为40℃和7,在40℃以下和p H6~8之间有较好的稳定性;Ca2+、Mg2+和丙酮能够明显促进提高脂肪酶的...
苹果果胶酯酶提取及其酶学性质探究
果胶酯酶 提取条件 酶学性质 苹果
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2016/7/1
以国光苹果为原料,通过单因素和正交实验考察了Na Cl浓度、p H、提取温度和提取时间对苹果果胶酯酶酶活的影响,确定了苹果果胶酯酶最佳提取工艺参数,并研究了苹果果胶酯酶的酶学性质。结果表明:在Na Cl浓度为2.5mol/L、p H为8.5、提取温度30℃和提取时间为27h时,苹果果胶酯酶的酶活达到0.98μmol/min·m L;该酶反应的最适温度为40℃,热稳定性较差,最适p H为11;金属离...
果胶酶在磁性复合载体上的固定化及其酶学性质
磁性复合载体 果胶酶 固定化 酶学性质
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2016/6/29
通过Fe3O4磁核与海藻酸钠明胶制备磁性复合载体,戊二醛交联后协同对果胶酶进行固定化,并研究固定化酶的酶学性质。利用正交实验优化固定化酶的制备条件,比较研究了固定化酶与溶液酶的酶学性质。结果表明:在Fe2+(5mol/L)∶Fe3+(5mol/L)体积比为0.75∶1的溶液中,制备Fe3O4磁核;3.5%海藻酸钠与3.0%明胶以2.5∶1的体积比,加入3.0mg/m L Fe3O4磁核量,在体积分...
β-环糊精葡萄糖基转移酶突变基因的表达及突变酶酶学性质分析
β-环糊精葡糖糖基转移酶 定点突变 环化活性 温度 p H
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2016/6/30
通过对已构建的β-CGTase质粒载体采用一步PCR法进行大片段基因的定点突变,得到三个带有突变位点的质粒载体,并将其进行转化得到突变菌株。分析突变酶的酶学性质并与β-环糊精葡萄糖基转移酶比较,结果表明突变酶酶活力提高到原酶活力的1.6倍以上,且突变酶作用的最适温度60℃、最适p H6.0、在60℃下和p H5~8范围内均非常稳定,经方差分析突变酶与原酶的酶学性质差异不显著(p0.05),但是酶活...