搜索结果: 1-15 共查到“抗血清”相关记录61条 . 查询时间(0.126 秒)
CpxR是细菌中Cpx双组分系统（two component system，TCS）的反应调控蛋白，通过调控靶基因的转录表达，在细菌细胞膜稳定及毒力方面发挥作用。本研究旨在探究TCS CpxR对禽致病性大肠杆菌（avian pathogenic Escherichia coli，APEC）基本生物学特性、抗血清杀菌能力及致病性的影响。利用Red同源重组系统及互补质粒构建cpxR基因缺失株、互补株，...
甘蔗黄叶病毒(Sugarcane yellow leaf virus,ScYLV)属于黄症病毒科(Luteoviridae)、马铃薯卷叶病毒属(Polerovirus),主要由蚜虫传播,能够侵染甘蔗、玉米等多种作物,引发严重的植物病害。本研究将编码ScYLV运动蛋白(Movement protein,MP)的基因连接到pDB-His-MBP原核表达载体上,转化到大肠杆菌菌株Rosetta中,经IP...
大麦黄矮病毒(Barley yellow dwarf viruses, BYDVs)属于黄症病毒科,主要以蚜虫为介体进行传播,引发多种作物减产或绝收。本文将BYDV-PAV青海分离物的运动蛋白(MP)克隆到原核表达载体pDB-MBP-His上,转化大肠杆菌Rosetta(DE3),在IPTG诱导下表达蛋白分子量约为61 kDa的融合蛋白。将纯化后的蛋白作为抗原免疫‘新西兰’大白兔制备抗血清,Wes...
草莓镶脉病毒ORF I基因的克隆、原核表达及抗血清制备
Strawberry vein banding virus gene ORF I clone prokaryotic expression antiserum preparation
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2020/3/13
The total DNA was extracted from strawberry leaves infected with Strawberry vein banding virus (SVBV) by CTAB method. Specific primer pairs were designed to amplify the gene ORF I of SVBV-Shenyang iso...
西瓜花叶病毒抗血清制备及其应用
抗血清 外壳蛋白 原核表达 西瓜花叶病毒
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2020/2/12
西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus, WMV)是危害葫芦科作物的重要病毒。制备特异性强、效价高的抗血清对快速准确检测和鉴定WMV具有重要意义。本研究将WMV外壳蛋白(Coat protein,CP)基因克隆到原核表达载体pEHISTEV获得pEHISTEV-WMV-CP。将pEHISTEV-WMV-CP转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导,成功表达出分子量约为36 ...
小麦蓝矮植原体SWP1效应蛋白的抗血清制备及检测应用
小麦蓝矮病植原体 SWP1 原核表达 抗血清
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2020/2/14
小麦蓝矮病是西北冬麦区一种重要的植原体病害,造成严重的产量损失。为进一步探究小麦蓝矮植原体的致病机理,通过原核表达获得其致病因子SWP1的重组蛋白并制备抗血清。将PCR扩增到的SWP1基因片段插入到原核表达载体pET-30a(+)上,导入E.coli BL21 (DE3)中,表达出约12 kDa含His标签的融合蛋白。用纯化的融合蛋白注射大白兔皮层,获得了特异性较强的SWP1抗血清,其效价为1∶4...
落葵皱缩花叶病毒CP基因的原核表达及多克隆抗血清的制备
落葵皱缩花叶病毒 紫茉莉 cp基因 多克隆抗血清 ID-ELISA, 蛋白质印迹法
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2018/6/1
以感病紫茉莉叶片为材料，采用RT-PCR方法克隆落葵皱缩花叶病毒（Basella rugose mosaic virus，BaRMV）的外壳蛋白（coat protein，CP）基因，并构建pET30a-BaRMV-cp原核表达载体。将原核表达载体转化大肠杆菌[Rosetta(DE3)PlysS]，成功诱导表达得到大小约为40.0 kD的与预期大小相符的融合蛋白（His-CP）。SDS-PAGE电...
甘薯褪绿矮化病毒RNase3蛋白的原核表达及抗血清制备
甘薯褪绿矮化病毒 RNase3基因 原核表达 抗血清
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2018/6/27
以本实验室保存的重组质粒为模板, 利用PCR方法扩增获得了甘薯褪绿矮化病毒SPCSV的RNase3基因, RNase3基因由690个核苷酸组成, 编码229个氨基酸。将RNase3基因克隆到原核表达载体pET-28a(+), 转化大肠杆菌BL21(DE3), 经IPTG诱导, 对诱导产物进行SDS-PAGE分析。结果表明, RNase3在大肠杆菌中能高效表达, 融合蛋白分子量约为26.5 kD。以...
SLA-Ⅰα链和β链的原核表达与抗血清制备
链 原核表达 抗血清
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2015/7/28
猪主要组织相容性复合体Ⅰ类分子又称猪白细胞抗原Ⅰ类分子（SLA-Ⅰ），参与内源性抗原在体内的递呈过程，其结构包括重链（α链）和轻链（β链）两部分。本研究首先采用RT-PCR从原代猪肺泡巨噬细胞（PAM）中扩增出SLA-Ⅰ α链胞外区基因和β链基因；继而利用原核表达系统获得包涵体形式表达的SLA-Ⅰ α链胞外区和β链重组蛋白质；将目的重组蛋白质洗涤、复性、纯化后，经Western blot及质谱技术...
旨在探究1型鸭甲肝病毒（DHAV-1）VP3蛋白抗血清的中和活性并鉴定VP3的线性B细胞表位。利用pGEX-4T-1表达载体，在BL21(DE3)宿主菌中原核表达DHAV-1 VP3基因，以切胶纯化出的蛋白质为抗原免疫兔制备多克隆抗体，通过鸡胚中和试验对多抗的中和效价进行检测；采用Karplus&Schulz、Emini、Jameson-Wolf和Parker方法分别对柔韧性、表面可及性、抗原性及...
华溪蟹功能性重组金属硫蛋白的表达及抗血清制备
河南华溪蟹 金属硫蛋白 抗血清
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2014/9/29
采用SUMO融合表达系统表达河南华溪蟹金属硫蛋白（Metallothionein，MT），经Ni 离子螯合柱分离纯化后，用SDS-PAGE、紫外光谱扫描鉴定，并对重组MT的金属结合及清除自由基能力进行了检测.同时，利用纯化的融合蛋白SUMO-MT免疫BALB/c小鼠制备抗血清，间接ELISA检测该抗血清的效价，Western blot和免疫组化染色检测其特异性.结果表明，河南华溪蟹MT以可溶形式获...
东北白鹅CD8α基因的克隆及其胞外区基因的表达与抗血清的制备
东北白鹅 CD8&alpha 基因表达 T淋巴细胞
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2015/5/28
根据GenBank公布的绿头鸭CD8α（AF378373）基因序列设计引物，通过RT-PCR获得东北白鹅CD8α基因。根据测序结果设计特异性引物，克隆得到东北白鹅CD8α胞外区基因，并在pET-30a（+）及pET-28a（+）/Rosetta(DE3) pLysS系统中进行原核表达。经IPTG诱导重组蛋白质获得表达，Ni-NTA柱亲和层析获得纯化的重组蛋白质，以纯化的重组蛋白质（pET-30a-...
制备香蕉线条病毒广东分离物（BSV-GD）的抗血清，可为BSV-GD 的快速检测和进一步研究BSV 编码蛋白的功能提供条件。通过常规分子生物学方法，克隆了BSV-GD 衣壳蛋白（Coat protein，CP）功能域基因，构建了该基因的原核表达载体pET28b-CP，并诱导表达了大小约为46.5 kD 的融合蛋白His-CP。可溶性分析表明该融合蛋白以包涵体形式存在。利用His 标签纯化试剂盒对目...
东北白鹅CD4基因的克隆及其胞外区的表达与抗血清的制备
东北白鹅 CD4 基因表达 T淋巴细胞
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2014/5/27
本研究根据GenBank公布的绿头鸭CD4（AF378701）基因序列设计引物，RT-PCR获得东北白鹅CD4基因。根据测序结果设计特异性引物，克隆得到东北白鹅CD4胞外区基因，并在pET-32a（+）/Rosetta(DE3) pLysS系统中进行原核表达。经IPTG诱导重组蛋白获得表达，Ni-NTA柱亲和层析获得纯化的重组蛋白，以纯化的重组蛋白为免疫原制备兔抗鹅CD4胞外区抗血清。I-ELIS...