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猪精原干细胞体外分离培养及诱导分化的研究
精原干细胞 体外培养 诱导分化 基因表达
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2014/9/26
本研究旨在建立猪精原干细胞（Porcine spermatogonial stem cells，pSSCs）体外分离和诱导分化，并探索pSSCs定向分化及分化过程中关键基因的表达情况。采用差速贴壁法分离pSSCs和支持细胞（Sertoli），采用生化和免疫学方法鉴定其干细胞特性；传至3代后通过添加不同诱导剂，诱导SSCs向脂肪细胞、神经元样细胞和成骨细胞分化，并通过生化染色、qRT-PCR和免疫细...
旨在探究1种简便高效分离纯化山羊精原干细胞的方法。采用三步酶消化对4月龄的山羊睾丸进行处理，分离获得单细胞悬液。将细胞依次培养于明胶、大鼠鼠尾胶原和层粘连蛋白涂层的细胞培养皿中，根据各类细胞贴壁能力和贴壁速度不同进行精原干细胞的富集和纯化，并在各步纯化过程中用精原干细胞特异标记分子PLZF和CDH1进行免疫荧光标记染色鉴定，统计精原干细胞所占的比率，并对获得的细胞进行初步培养和鉴定。每克睾丸中分离...
精原干细胞的分离培养及移植等相关技术对于雄性动物不育、精子发生机理的研究及转基因新技术的建立都具有重要意义。虽然小鼠精原干细胞的生物学特性已经研究得较为清晰，并建立了较为成熟的分离、纯化、培养技术体系，其受体制备和移植技术也较为成熟，但是，技术效率仍然很低。对小鼠精原干细胞生物学特性、分离培养及受体制备与移植方法的分析总结，将对干细胞制备最佳时机的确定、已有精原干细胞分离纯化、培养和受体准备及移植...
利用精原干细胞建立转基因动物的研究进展
精原干细胞 转基因 动物
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2009/10/22
精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)是雄性哺乳动物体内的一种成体干细胞,在睾丸微环境中既具有自我更新潜能,又具有定向分化潜能,是自然状态下出生后,动物体内在整个生命期间进行自我更新并能将基因传递至子代的唯一成体干细胞。精原干细胞在建立转基因动物中具有重要的应用价值,现已成为转基因研究领域的热点之一。介绍了精原干细胞的来源、形成、类型及分化,同时对其在转基因动物...
介绍了精原干细胞( SSCs) 的起源、分化潜能、分离纯化、体外培养、特征鉴定、移植及其介导的转基因技术, 概括了SSCs 研究的意义, 并对其应用前景进行了展望。
家畜精原干细胞移植研究进展
精原干细胞 移植 家畜
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2009/7/1
论述了精原干细胞的生物学特征、分离纯化与冷冻保存, 探讨了家畜精原干细胞移植的国内外研究成果, 展望了其在畜牧上的应
用前景。
将6 日龄小鼠生精上皮单细胞分别接种于BRL和STO饲养层上,于32 ℃或37 ℃培养,研究其对精原干细胞的影响。结果:在培养的第1周内,2个及4个相连的精原细胞合胞体明显增多。培养１周后,多数精原细胞经短暂的存活及分裂活动后退化消失,培养体系中仅保留下少量单个及由细胞间桥相连的双个及4个成串或成团的A型精原细胞。这些细胞在随后的培养过程中,不表现明显的分裂活动,呈碱性磷酸酶阳性反应。根据精原干细...
不同培养方法对鸡精原干细胞体外培养效果的影响
鸡 精原干细胞（SSCs） 体外培养 传代
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2008/12/1
本研究从孵化至16 d的鸡胚睾丸中分离获取精原干细胞（Spermatogonial stem cells，SSCs），比较3种培养液、2种处理（有无饲养层）对SSCs生长的影响，并对SSCs保持特性进行鉴定。结果表明：在无饲养层细胞存在的条件下，DMEM、TCM199和RPMI1640培养液中，SSCs的存活时间分别为6.5 、6.0 和3.5 d，DMEM 和TCM199培养液之间差异不显著（P...
精原干细胞更新分化的影响因素
精原干细胞 干细胞因子 白血病抑制因子 VA 表皮生长因子 胶质细胞源神经营养因子
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2008/5/29
精原干细胞可以体外培养、冷冻保存、遗传操作及移植，因而在医学、生物学及动物科学方面均有广泛应用前景。根据现有资料阐述一些因素，包括c-Kit受体及其配体SCF、白血病抑制因子（LIF）、维生素A（VA）、表皮生长因子（EGF）、胶质细胞源神经营养因子（GDNF）、激素和温度，对精原干细胞更新分化的影响。
探索血清浓度以及干细胞因子（SCF）、白血病抑制因子（LIF）、胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）对牛精原干细胞体外增殖的影响，并对其进行鉴定。试验1：以高糖DMEM为基础培养液，添加浓度为0%、2.5%、5%和10%的胎牛血清(Fetal bovine serum,FBS)，分为4个试验组。结果表明，血清浓度影响牛精原干细胞的体外增殖，添加2.5%的FBS比较合适。试验2：培养液中加入不同浓度...
鸡胚精原干细胞定向诱导分化为成骨细胞的初探
精原干细胞 成骨细胞 分化
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2008/4/22
研究体外定向诱导鸡胚精原干细胞（Spermatogonial stem cells，SSCs）向成骨细胞分化的能力。采用地塞米松+β磷酸甘油钠+维生素C组成的诱导液对鸡胚精原干细胞进行诱导，利用Von Kossa’s法、改良的钙钴法及免疫组化I型胶原 (Collagen Ⅰ)进行成骨细胞特性鉴定。结果表明：诱导后成骨细胞形成率达到82%，诱导后的细胞经Von Kossa’s染色可见细胞间布满黑色...
鸡胚精原干细胞体外保存能力的研究
鸡 精原干细胞 冷冻保存
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2008/4/22
采用二酶3步法获取孵化第19 d的鸡胚精原干细胞（SSCs）， 比较在快速冷冻条件下3种冷冻保护剂 （DMSO、乙二醇、甘油）在3个浓度5％、10％、15％条件下对鸡胚精原干细胞的冷冻保存效果进行研究。结果显示：（1）当DMSO的浓度为5％、10%及15%时，复苏后细胞存活率分别为73.1％、88.6％和74.8％，三者差异显著（P<0.05）；而10％ DMSO保存精原干细胞的存活率、复苏后培养...
牛精原干细胞的分离和纯化及体外培养的一般特性
精原干细胞 分离 体外培养 牛
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2008/4/22
采用两步酶消化法制备5月龄的牛生殖细胞悬液，用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞,接种于含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基中，37 ℃,5% CO2饱和湿度培养，观察培养细胞的生长和形态变化。结果5月龄牛的曲细精管主要包含细胞为精原细胞、Sertoli细胞，每克睾丸实质收获生精上皮细胞总数平均为3.18×106个细胞，精原细胞纯化后纯度达69.27%，精原细胞主要分布于27%～35%...