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Cop基因簇是黄单胞菌属抗铜的主要基因位点,而水稻白叶枯病菌PXO99相对其他菌株对铜离子更加敏感。本研究发现抗铜基因CopAB的6个氨基酸自然缺失突变是造成PXO99对铜离子敏感的主要因素。通过对CopAB的缺失突变体和恢复抗铜能力的重组菌株的耐铜实验和接种实验,证实了CopAB不仅参与黄单胞杆菌的抗铜功能,同时作为一种致病因子参与黄单胞杆菌与水稻的互作。为验证CopAB基因的功能,从国内白叶枯...
抗苄嘧磺隆雨久花ALS基因突变研究
乙酰乳酸合成酶 苄嘧磺隆 雨久花 抗药性
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2009/10/12
【目的】近年来,中国东北水稻田抗药性雨久花发生严重,部分地区用苄嘧磺隆已无法有效控制该杂草的危害。为明确该杂草抗药性发生的根本原因,本试验从分子水平上研究了稻田杂草雨久花(Monochoria korsakowii)对苄嘧磺隆的抗药性机理,以确定导致抗药性产生的乙酰乳酸合成酶(ALS)氨基酸突变位点。【方法】利用PCR技术,通过对抗药性雨久花生物型和敏感性雨久花生物型ALS片段进行扩增和基因克隆,...
乙酰羟基酸合成酶(AHAS)是磺酰脲类、咪唑啉酮类、三唑嘧啶磺酰胺类及水杨酸类除草剂的作用靶标,大田使用中杂草对这几类除草剂产生抗性的主要因素是AHAS酶的突变。利用大肠杆菌AHAS Ⅱ中464位的色氨酸突变体(W464A、W464F、W464L、W464Y),研究了野生型和突变酶对商品化除草剂(氯嘧磺隆、氯磺隆、咪唑乙烟酸、咪唑喹啉酸)以及烷硫基磺酰脲的敏感性。野生型E. coli AHAS Ⅱ...
除草剂靶酶—AHAS酶及基因突变体与除草剂设计(I). 野生型和突变型E. coli AHAS II 酶动力学性质的系统研究
乙酰乳酸合成酶 乙酰羟基酸合成酶 定点突变 突变体 酶的动力学
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2016/3/29
针对除草剂敏感型乙酰羟基酸合成酶E. coli AHAS II的抗性域,引入W464A、W464F、W464L、W464Y点突变。采用Megaprimer PCR定点突变,测序鉴定,构建了4个E. coli AHAS IIW464位点的突变体。通过对E. coli AHAS II野生型及突变体动力学性质的测定,发现它们对于底物—丙酮酸及3种辅助因子(FAD、ThDP、Mg2+)有着不同的特征常数。...