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搜索结果: 1-15 共查到遗传学 大肠杆菌相关记录18条 . 查询时间(1.164 秒)
水稻新基因OsRwp34在大肠杆菌中表达的毒害作用。
对大量的大肠杆菌(Escheri chiacoli)、酵母(Yeast)和果蝇(Drosophila melanogaster)已知基因起始密码子和终止密码子上、下游各30个碱基序列,用重新定义单碱基信息冗余(记为D1(l),l是位点)和紧邻碱基的信息冗余(记为D2(l)),统计计算每个位点的D1(l)和D2(l)值。从结果看,双碱基比单碱基携带更多的信息;酵母和果蝇基因起始密码子上游-3位点D1...
摘要通过硫酸二乙醋诱变,选得一株抗苯乙醇的DNA复制突变型FDI05。从温度和氨基酸饥饿对DNA残余合成的影响,以及在限制温度中噬菌体增殖情况可以看到,FD105是DNA复制链延长突变型。我们证实了温度敏感和苯乙醇抗性是同一基因突变的结果。这一基因被定位在dnaB座位。已有的研究表明苯乙醇的作用部位是细胞膜,链延长dnaB 突变型同时抗苯乙醇,这是链延长与膜有关的一个旁证。 ...
摘要用pBR322作运载体,构建了含有蓖麻蚕核糖体RNA基因(rDNA)完整重复单位的重组质粒-pAR3。pAR3含有11.1kb rDNA完整重复单位,包含有pARI和pAR2所携带的rDNA片段。制作了rPA3和rDNA的限制性内切酶图谱。发现限制酶图谱与郑仲承等报道的一致,而与家蚕的rDNA的图谱不同。
摘要含泡嘧啶的T4DNA 用核酸内切酶Eco RI、SalI、Hind III切割,特别是用Eco RI不完全切割,所得片段以质粒pBR 322作载体,在大肠杆菌E.coli KH802菌株中进行了无性繁殖。5,000个无性繁殖系经标记获求地作遗传鉴定,筛选基因42和43的无性繁殖系,并对其所带T4DNA片段的图位和有关基因的功能表达进行了初步分析。试验证明,10个无性繁殖系带有基因43片段,其中...
摘要使用琼脂糖凝胶电泳、DNA限制性内切酶水解以及电子显微镜等分析手段,证明在两株recA- 的大肠杆菌质粒pBR322转化子中,pBR322 DNA的多倍周长环形寡聚物被大量合成。这个事实 说明质粒pBR322 DNA在大肠杆菌细胞中的遗传重组似有独立于recA基因的途径。本文介绍一 个改进的大肠杆菌“清亮裂解液”制备法。按照这个方法制备的细菌清亮裂解液可排除染色 体DNA的污染。 ...
摘要通过接合转移,把F1、F11、P、W、X、I型的14种质粒分别引入大肠杆菌复制发动突变型dna P 18,发现只有I型质粒R144对于dnaP 18具有抑制作用,消阻遏质粒R144drd3的抑制能力高 于质粒R144约一万倍而达到完全的抑制。以下事实说明R144drd3并不通过整合到dndaP 18细 菌的染色体上而带来对于dndP18的抑制:(1)dnaP18(R144drd 3)细菌的染色...
家蚕(B. mori)后部丝腺体丝心蛋白 mRNA及其基因克隆,前人已有报道[6,9,11,13]. 本文介绍我们以蓖麻蚕(Attacus ricini)后部丝腺体为材料分离出Poly(A)+RNA,通过反转录途径将mRNA-cDNA杂双链与质粒pBR 322重组,转化大肠杆菌C600,从转化菌中筛选出一株含有插人了外源cDNA片段的重组克隆,并对它进行了初步鉴定。
在进行DNA重组和大量制备’2p标记的 DNA分子探针过程中,我们参照Clewell等〔41清亮裂解液方法和Zasloff等fsl的酸酚法,综合发展了一种大量分离纯化质粒DNA的清亮裂解液一酸酚法此方法操作简便、重复性好、产量高,其纯度和生物活性可满足DNA重组与制备32p 标记DNA探针的要求,既省去了昂贵费时的氯化艳一澳化乙咤密度梯度超离心,又避免了细菌裂解液直接酚提时溶液过于粘稠、不易操作、...
Bolivar等u]于1977年用人工重组技术从ColEl质粒构建出声pBR322质粒,由于pBR322质粒带有两个抗药性标记,有多拷贝以及多种限制性内切酶单一切点等特性,近年来已被广泛用作重组DNA实验的载体。Collins等[2]用pBR3222质粒与λ charon 4A的带有Cos位点的EcoRI酶切片段重组,进一步得到cosmid质粒,cosmid质拉除了具有pBR322质粒原来的优点外...
摘要 用Ncol Ⅰ和EcoRI双酶酶切,获得人酸性成纤维细胞生长因子haFGF基因,将该基因片断连接进入pBV220的EcoRI位点。连接物转化入大肠杆菌RR1,用菌落原位杂交的方法筛选出杂交阳性菌株,用酶切和Southern Blot的方法确定haFGF的插入与否以及插入方向的正反,结果我们得到了haFGF正向插入在pBV220 PLPR启动子下游的重组质粒pBV-αFGF。42℃热诱导使重组...
摘要 本文采用寡核苷酸介导的定位诱变技术修正了人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8合成基因中出现的合成错误,在该基因编码区的201位插入了原来缺失的G残基,从而使之恢复正确读框。经对修正基因进行DNA全序列测定,表明定位诱变的结果符合设计要求。在此基础上,利用原核高效表达载体pBV220在P_RP_L串联启动子的控制下在大肠杆菌中对该基因进行了表达,并测定了重组人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白...
摘要 从人胚肺二倍体细胞KMB17抽提总RNA,经RT-PCR扩增到人IL-11cDNA,克隆于pBS-SK,以双脱氧链终止法进行序列分析;扩增去除N 端第一个氨基酸的IL-11cDNA,克隆于硫氧还蛋白融合表达载体pThioHisA,经过对表达质粒的改造,使融合表达的IL-11能被肠激酶精确切割;表达产物经金属鏊合亲合层析后经肠激酶切,再通过阳离子交换层析纯化后,用其依赖细胞株7TD1检测活性....
摘要 为进一步探讨大肠杆菌脑微血管内皮细胞侵袭基因ibeB的生物学特性 ,将ibeB基因克隆到pET2 8a(+)载体 ,以E .coliBL2 1 (DE3)为宿主菌 ,经IPTG诱导后 ,通过Ni2 + NTA树脂提纯IbeB蛋白 .SDS PAGE确定纯化蛋白的分子量 ;应用无蛋白酶的体外转录和翻译系统进一步鉴定ibeB基因表达蛋白的分子量 ;通过 [3 5S]Met标记的体内T7表达体系...
摘要 通过PCR方法 ,从人胎儿心肌基因组DNA中得到precytc基因 (有 1个内含子 ) ,剔除内含子后 ,得到细胞色素c基因的编码序列 .测序结果表明 ,该基因与GenBank中报道的人细胞色素c基因核苷酸顺序完全一致 .将其插入原核表达载体pET3a的NdeⅠ和HindⅢ位点之间构建pET3a cytc重组质粒 ,并成功转化入E .coliBL2 1(DE3)中 .经IPTG诱导表达后 ...

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