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丙型肝炎病毒蛋白酶抑制剂高通量筛选模型的建立及应用
丝氨酸蛋白水解酶 高通量筛选模型 光共振能量转移
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2012/5/8
应用荧光共振能量转移(FRET)法检测丙型肝炎病毒(HCV)丝氨酸蛋白水解酶(NS3~4A)活性，建立HCV蛋白酶抑制剂筛选模型。方法 将质粒pMAL~c2/NS3-4A转化到大肠杆菌K12TB1中，经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达，亲和层析柱纯化得到麦芽糖结合的NS3-4A融合蛋白，用FRET法测定蛋白水解酶活性，建立特异性蛋白酶抑制剂筛选模型，优化反应体系，评价模型的可靠性。...