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CSW3基因序列来源于半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)全基因组测序项目，是经过筛选得到的雌性特异候选基因之一。本研究探索了半滑舌鳎雌性相关基因CSW3的表达与应用，构建了半滑舌鳎雌性特异CSW3基因重组表达载体，通过大肠杆菌进行了体外重组表达，对基因表达产物进行分离纯化，并通过蛋白转染的方法研究了纯化的蛋白对几个性别相关基因的影响。结果显示，雌性特异CSW3重组蛋白注射鱼体...
我国在半滑舌鳎性染色体进化及性别决定和底栖适应机制研究取得突破
半滑舌鳎性 染色体进化 性别 底栖适应机制
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2014/3/12
在国家自然科学基金重点 (31130057)等项目的支持下，中国水产科学研究院黄海水产研究所、深圳华大基因研究院、德国Wuerzburg大学等在半滑舌鳎全基因组精细图谱构建、性染色体进化以及性别决定和底栖适应机制研究方面取得突破性进展，研究论文近日分别在Nature Genetics和Genome Research发表。
为研究HIRA基因在半滑舌鳎胚胎发育中的作用及其组织差异表达，本实验以半滑舌鳎为研究对象，采用同源克隆策略从其精巢中分离了长度为764bp的HIRA部分cDNA序列，该片段编码254个氨基酸，具有5个WD结构域。对氨基酸进行比较发现，半滑舌鳎HIRA与比较物种的氨基酸序列具有很高的同源性，与红鳍东方鲀亲缘关系最近。运用实时定量PCR分析表明，HIRA mRNA在多细胞期到原肠胚期的表达量较高，表明...
以本实验室构建的半滑舌鳎BAC文库为基础，通过对其进行有序混合，构建了两步PCR筛选体系；对性别决定相关的sox9基因的序列设计特异性引物，筛选获得阳性单一BAC克隆。利用BAC-FISH技术将此包含sox9基因的BAC克隆定位在半滑舌鳎染色体上。结果显示，sox9基因在雌、雄半滑舌鳎的一对常染色体的长臂上分别存在2个杂交信号位点，信号稳定且特异。研究证实了该文库筛选体系的有效性；首次实现了对性别...
半滑舌鳎促性腺激素α亚基cDNA的克隆及组织表达特征
半滑舌鳎 促性腺激素α亚基基因 cDNA克隆 qRT-PCR
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2015/6/3
采用同源克隆和末端快速扩增（RACE）方法，从半滑舌鳎脑垂体中克隆了促性腺激素α亚基（CGα）全长cDNA（GenBank序列登录号：JQ364953）。半滑舌鳎CGα基因全长685bp，其开放阅读框384bp，编码了含127个氨基酸的蛋白，N端33个氨基酸为信号肽。半滑舌鳎CGα成熟肽与其他脊椎动物CGα成熟肽结构特征相似，具有10个半胱氨酸残基和两个N-糖基化位点。CGα成熟肽序列分析表明，半...
从半滑舌鳎Cynoglossus semilaevis Günther脑垂体中提取总RNA，利用RT-PCR和RACE技术首次克隆得到半滑舌鳎促滤泡激素（FSH）基因全长cDNA序列。半滑舌鳎FSH cDNA全长为541bp，开放阅读框为393bp，编码130个氨基酸（GenBank序列登录号为：JQ277933）。发现一个N-糖基化位点：24-27 NTT。与其他脊椎动物的FSH成熟肽氨基酸序列...
采用同源克隆和末端快速扩增（RACE）方法，首次获得全长为1 319bp的半滑舌鳎膜孕激素受体（mPRα）的cDNA序列；将推断的氨基酸序列与其他物种mPRα氨基酸序列进行多重比较分析，发现存在7个跨膜区域。使用MEGA 4.0临位相联法和ClustalX方法对mPRα的氨基酸序列进行聚类分析和序列相似度分析。结果表明，半滑舌鳎mPRα与漠斑牙鲆、大西洋绒须石首鱼以及青鳉等鱼类的mPRα聚为一支，...
本研究克隆了半滑舌鳎干扰素调节因子7 (CsIRF-7) cDNA的全长序列，并对该基因进行了结构特征分析，同时还完成了该基因在半滑舌鳎各组织中表达水平的定量分析。结果表明，CsIRF-7基因cDNA全长为1 957 bp，其中包含48 bp的5′-UTR、1 302 bp的ORF和607 bp的3′-UTR。CsIRF-7 cDNA编码一个由433个氨基酸残基组成的多肽。氨基酸序列比对结果表明，...
利用在生长激素（GH）、生长激素释放激素（GHRH）和垂体腺苷酸环化酶激活多肽（PACAP）基因中发现的7个微卫星位点，分析了半滑舌鳎两个野生群体（渤海群体和黄海群体）和1个养殖群体间以及各群体内雌雄个体间的遗传多态性差异。结果表明，7个位点中有4个位点表现出多态性，在3个群体中的等位基因数的分布范围为2~37，平均为9.5；有效等位基因数分布范围为2~28.9，平均为8.4。各位点的平均观测杂合...
半滑舌鳎养殖群体和减数分裂雌核发育群体的微卫星标记遗传多样性分析
半滑舌鳎 养殖群体 微卫星标记 减数分裂雌核发育群体 遗传多样性
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2015/6/1
利用24对微卫星分子标记对半滑舌鳎Cynoglossus semilaevis的养殖群体和减数分裂雌核发育群体进行遗传多样性分析。结果表明，两个半滑舌鳎群体平均等位基因数分别为7.0和4.8，平均有效等位基因数分别为3.935和2.411，平均观测杂合度（HO）分别为0.713 5和0.586 5，养殖群体的遗传多样性明显高于减数分裂雌核发育群体。有1个位点在养殖群体中偏离哈代 温伯格平衡，13个...
在封闭循环水养殖条件下，进行5×3双因素随机设计动物试验，即5种饲料蛋白质水平（43%、46%、49%、52%和56%；以A—E组表示）和3种饲喂饱食度水平（100%、90%和80%；以Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ水平表示），共15个处理，每处理3重复，试验期108 d。探寻蛋白质营养与饱食度对工厂化养殖半滑舌鳎幼鱼（110±25 g）生长与免疫的影响。结果表明,（1）高蛋白水平与高饱食度投喂的增重效果最佳，E组增...
半滑舌鳎精子冷冻保存
半滑舌鳎 精子 冷冻保存
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2015/5/28
半滑舌鳎精子冷冻保存对于人工繁殖育苗、杂交育种、雌核发育及其性别控制研究具有重要的意义，为此，本文对半滑舌鳎精子冷冻保存方法进行了研究。分别利用2.8 mol/L的二甲基亚砜（DMSO）、甘油（Gly）和1，2-丙二醇（PG）冷冻保存该鱼精子。结果显示，DMSO冷冻保存精子的活力较高。利用MPRS+2.8 mol/L DMSO以1∶05、1∶1、1∶1.5和1∶2的比例稀释并冷冻精子，1∶1比例...
半滑舌鳎卵巢发育的组织学和形态数量特征研究
半滑舌鳎 卵巢发育 组织学
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2015/5/28
采用组织学方法系统研究了人工养殖条件下半滑舌鳎亲鱼卵巢的组织发育周年变化特征。结果表明，卵母细胞发育可分为6个时相，卵巢发育分为6期。卵巢不同发育时期都由不同类型的卵母细胞组成，半滑舌鳎为非同步分批多次产卵类型。周年发育过程中，6月龄前的鱼卵巢发育处于第Ⅰ期；9-12月龄卵巢可发育至第Ⅱ期；12月龄半滑舌鳎性腺可发育达到Ⅲ期，并一直保持至24月龄。3龄雌鱼达到性成熟，卵巢可发育至第Ⅳ期；随着水温和...