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旨在构建表达猪圆环病毒2型（PCV2）cap蛋白的重组罗伊氏乳酸杆菌（Lactobacillus reuteri，L.reuteri），并评价其在小鼠体内诱导的免疫应答效果。利用PCR扩增实验室分离保存的PCV2b型毒株的cap蛋白基因，以猪源L.reuteri为宿主菌，构建表达cap蛋白的重组菌株pPG-T7 g10-PPT-cap/L.reuteri，通过口服免疫BALB/c小鼠。采用间接EL...
含有Th细胞表位的合成PCV2 ORF2 Cap多肽抗原的表达及免疫原性分析
PCV2 Th细胞表位多肽 Cap蛋白
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2015/12/30
拟测定在PCV2 ORF2 Cap P1多肽抗原中添加从PCV2 ORF1、ORF3中筛选的Th细胞表位多肽在促进其免疫原性中的作用，以及合成表达的PCV2 ORF2 Cap P1多肽抗原作为疫苗抗原的可行性。采用生物信息学及分子生物学方法，筛选获得1条泛宿主新型Th细胞表位多肽和3条PCV2特异的含有Th细胞抗原表位的多肽序列，然后将这4条Th细胞多肽氨基酸序列与筛选自ORF2 Cap1上的1条...
猪圆环病毒2型Cap蛋白的表达及在ELISA中的初步应用
圆环病毒2型 Cap蛋白 间接ELISA
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2013/12/3
本研究旨在建立以PCV2 Cap蛋白为包被抗原的间接ELISA检测方法，构建猪圆环病毒2型（PCV2）ORF2基因原核表达质粒pET32aORF2并转化至Rosetta菌，在1.0 mmol·L-1 IPTG和37 ℃条件下诱导下，Cap蛋白获得高效表达，Western blot检测证实其具有免疫反应活性，以纯化的蛋白为抗原建立了检测猪圆环病毒2型抗体的间接ELISA方法。结果表明抗原最适包被浓...
【目的】猪圆环病毒2型（PCV2）是引起断奶仔猪多系统衰竭综合症（PMWS）的重要病原,其基因组ORF2编码的Cap蛋白为病毒的主要结构蛋白,起保护性抗原作用,对其进行抗原表位鉴定十分必要。【方法】本研究采用杆状病毒表达的重组Cap蛋白作为免疫原制备5株单克隆抗体,通过原核表达系统对ORF2基因进行了截短表达,先行对Cap蛋白抗原表位进行宽幅定位,然后利用合成多肽对Cap抗原表位做精确扫描定位。【...
利用改进的Cap-trapper法构建拟斯卑尔脱山羊草（Ae. speltoides Tausch）全长cDNA文库
全长cDNA文库 Cap-trapper法 拟斯卑尔脱山羊草
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2008/1/29
摘要Cap-trapper法是目前全长cDNA文库构建的重要方法之一。在引进、消化、吸收的基础上，通过设计引物，同位素检测，对末端转移反应条件控制等方面做了一些切实可行的改进，形成了一套简单易行的技术体系。利用改进的Cap-trapper 方法，成功构建了小麦B基因组的可能供体种拟斯卑尔脱山羊草（Ae. speltoides）的全长cDNA文库。经综合评价，文库的全长比例达到89.6%，重组率为9...