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【目的】通过RNA干扰技术抑制大豆籽粒中脂肪氧化酶基因表达,改良大豆品质,创造优良大豆新种质,探索大豆品质育种新途径。【方法】采用RT-PCR技术克隆大豆籽粒脂肪氧化酶基因（Lx1、Lx2、Lx3）核心保守序列357 bp片段,通过重组PCR构建大豆脂肪氧化酶基因RNA干扰表达载体,利用花粉管通道法转化大豆品种吉农18。【结果】获得了12个转基因株系,其中10个株系发生明显变化,SDS-PAGE电...
植物微小RNA（microRNA）研究进展
小RNA 干扰小RNA（siRNA） 微小RNA（miRNA） 发育
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2009/10/23
真核细胞中存在大量的非编码RNA，～22nt的小RNA是其中一类非常重要的调控RNA，主要包括siRNA和miRNA两种类型，二者均由类似RNaseⅢ的核酸内切酶一Dicer加工产生，随后进入沉默复合体抑制靶基因表达。miRNA分子与siRNA类似，但miRNA的前体在基因组上具有独立的转录单位，可自身折叠成发卡结构，其靶基因主要是与器官发生及生长发育相关的转录因子以及调控蛋白。miRNA在生物生...
根蘖型苜蓿根部RNA提取方法的比较
根蘖型苜蓿；总RNA；提取方法
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2013/6/23
以根蘖型苜蓿Medicago sativa的根、茎、叶为材料，利用紫外分光光度计和凝胶电泳法比较了改良CTAB 法和TRNzol试剂盒法等4种方法提取的苜蓿总RNA的产率和纯度。结果表明：改良CTAB法提取的RNA的OD260nm/OD230nm大于2.0，并且OD260nm/OD280nm接近1.8，具有较高的纯度。凝胶电泳结果表明，改良CTAB法有28S rRNA和18S rRNA 2条清晰的...
用反义RNA技术创造高直链淀粉玉米材料
玉米 高直链淀粉 反义RNA 淀粉分支酶基因sbe2a
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2009/10/12
【目的】利用反义RNA技术调控玉米淀粉的生物合成过程,创造高直链淀粉玉米材料。【方法】克隆玉米淀粉分支酶(sbe2a)基因片段,以载体pWGLL为基础,构建高效反义表达载体,通过花粉管通道法将其导入玉米自交系铁7922中。【结果】获得了4株转基因株系,GFP表达检测、PCR扩增和Southern杂交结果表明,目的基因已整合到基因组中,且能够遗传。对4株转基因植株进行RT-PCR和淀粉分支酶活性检测...
RACK1是一种多功能支架蛋白，广泛参与植物生长发育过程的调节。利用RNA干涉技术抑制水稻RACK1基因的表达，分析了RACK1基因在响应干旱胁迫中的功能。实时定量PCR对获得的转基因植株的RACK1基因表达分析结果表明，转基因水稻RACK1基因表达受抑制程度达50%左右。与非转基因水稻（对照）相比，转基因水稻耐干旱能力显著强于对照，其膜的过氧化酶和丙二醛的产生显著低于对照，而超氧化物歧化酶活性极...
非编码RNA的研究进展
ncRNA RNA组学 基因 调控
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2009/7/20
随着基因组测序等生物技术的进步和发展，越来越多的非编码RNA被发现，并且其功能也被逐渐鉴定出来。目前研究非编码RNA已经是当前生命科学研究的前沿热点，这些小分子RNA存在几乎所有高等的真核生物细胞中，对生物具有非常重要的调控功能。本文就ncRNA的研究进展作了简要介绍。
RNA干扰的研究进展
RNA干扰 双链RNA 转录后水平的基因沉默 小干扰RNA
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2009/7/3
RNA干扰（RNAi）是一种由双链RNA诱发的转录后水平的基因沉默现象，是近几年发展起来的基因表达调节新机制，广泛地存在于真菌、植物和动物中。主要介绍了RNAi的发现、分子机制、转基因载体构建策略以及RNAi在生命科学中广阔的应用前景。
[ 目的] 为更好地利用基因操作手段改良木薯品质和提取高质量的木薯总RNA 提供科学依据。[ 方法] 采用4 种方法提取木薯块
根RNA, 筛选一种最简单、有效的方法, 并利用RT- PCR 技术克隆木薯淀粉分支酶, 分析所提取RNA 的质量。[ 结果] 结果表明, 用改进的CTAB 法和plant RNA Reagent kit 均能提取高质量的RNA, 用plant RNA Reagent...
RNA干扰在农业分子育种中的研究进展
RNA 干扰 分子育种 抗虫 抗病
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2009/6/9
探讨了RNA 干扰技术的分子机制及其在农业分子育种中的应用, 随着研究的深入,RNA 干扰必将成为遗传育种工作者改良作物
品质, 培养抗虫、抗病毒新品种的有力手段。
甘薯茎总RNA的简易高效提取方法
RNA提取 甘薯
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2009/4/14
本文介绍了一种快速有效的提取甘薯[Ipomoea Batatas (L.)Lam]茎总RNA的简易方法，无需特殊试剂和贵重的仪器设备，可有效的去除甘薯中的多酚、多糖类物质。所提取的RNA经过甲醛凝胶电泳和紫外线分光光度计分析，RNA的质量较高，基本没有降解，可直接用于cDNA合成，Northern杂交等多种分子生物学实验。
水稻高效RNA干涉体系的建立及其在受体激酶基因功能研究中的应用
RNA干涉 T-DNA 水稻
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2008/9/12
利用RNA干涉(RNAi)技术，可以特异性的抑制真核生物体中目标基因的表达。本研究构建了适合水稻转化的RNAi诱导载体pCADS1341。为检测其有效性，使用它构建了针对GUS基因的RNAi载体，并利用基因枪转化法导入GUS基因稳定表达的转基因水稻愈伤组织。GUS染色分析结果表明该载体中RNAi诱导元件的瞬时表达可显著抑制GUS基因的表达。为探讨影响水稻中转基因诱导的RNAi效率的因素，对针对某个...
一种适用于地黄不同组织器官的RNA提取方法
地黄 RNA提取 抑制消减杂交 RACE
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2008/6/11
在药用植物中开展分子生物学研究时的常见困难是RNA提取困难，提取的RNA质量不能满足下一步试验要求。探索了一种适用于地黄不同组织器官的RNA提取方法并对提取的RNA质量在随后的分子生物学中进行了检验。结果证实通过该方法提取的RNA纯度和完整性较好，完全可以满足后续的分子生物学实验要求，也可以作为其它药用植物RNA提取的参考方法。
Effect of Lyophilization of Cotton Tissue on Quality of Extractable DNA, RNA, and Protein
Extractable DNA Cotton Tissue Lyophilization
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2008/6/4
Molecular genetic analysis in cotton (Gossypium hirsutum L.) is often limited by the availability of fresh tissue and the time necessary to extract deoxyribonucleic acid (DNA), ribonucleic acid (RNA),...
棉花高质量总RNA提取的一种有效方法
高质量总RNA提取 棉花
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2008/6/3
棉花抗病虫基因工程和纤维品质改良一直是国内外研究的热点之一,近年来许多实验室又开展了棉花功能基因组学研究,在这些研究中都需要提取高质量的RNA,但目前广为使用的TriZol reagent kit和异硫氰酸胍-酚-氯仿一步提取法从棉花中难以纯化出完整的RNA,尽管许多学者针对棉花也发展出了几种有效的方法,但是这些方法一般都费工、费时.本文综合比较这些技术,并对热CTAB法加以改进,提出了一种较为...