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2022年11月23日，中国医学科学院病原生物学研究所孙义成研究团队、杨剑研究团队和金奇研究团队在Science Advances《科学促进》在线发表了题为“Application of combined CRISPR screening for genetic and chemical-genetic interaction profiling in Mycobacterium tubercul...
汪铭课题组发展细胞选择性CRISPR/Cas9基因编辑工具（图）
汪铭课题组 细胞选择性 CRISPR/Cas9 基因编辑工具
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2023/1/6
CRISPR/Cas9是源自细菌获得性免疫系统的新一代基因编辑技术，在化学生物学、生物医学及基因治疗中具有潜在应用前景。CRISPR/Cas9技术使用引导RNA(single-guide RNA，sgRNA)识别靶标基因，并招募Cas9核酸酶对基因组进行切割、编辑等操作。然而，由于sgRNA识别基因组存在非特异性结合作用，现有CRISPR/Cas9技术应用于基因编辑时存在一定的脱靶效应，且缺乏对疾...
Advanced Science | 全球健康学院环境健康与生态安全系殷堃团队发表综述：基于CRISPR/Cas技术的微流控系统应用于传染性疾病分子诊断（图）
殷堃团队 传染性疾病 古细菌
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2023/1/9
近年来，新冠、猴痘等传染性疾病层出不穷，严重影响人类的健康生活。基于核酸的分子扩增检测常用作传染性疾病诊断的金标准。CRISPR/Cas系统作为原核生物的一种自我保护机制，也是大多数细菌及古细菌中抵御病毒入侵的一种获得性免疫方式。自2012年以来，科研人员常用CRISPR技术对生物的DNA序列进行敲除、突变、替换或添加。
中国科学院微生物研究所向华/李明研究团队此前发现一类全新的可以护卫CRISPR-Cas的双RNA型毒素-抗毒素系统CreTA（Science, 2021），进一步研究发现CreTA起源于mini-CRISPR结构，但其重复序列repeat发生了高度退化（Nucleic Acids Res, 2021）。CreTA的repeat序列为何会发生这一退化，其进化驱动力是什么，科学家们尚不清楚。近日，李明...
相信大家都十分讨厌蚊子，被蚊子叮咬后不仅瘙痒难耐，而且容易传染疾病。众所周知，只有母蚊子才会叮咬和传播疾病，通过改变性别控制蚊子种群进行病媒防治极为有效。除此之外，随着经济的快速发展，人们对肉、奶、蛋等的品质及需求量剧增，控制畜禽性别来快速定向繁殖，可以更好的满足迅速增长的社会需求，对畜禽生产有着十分重要的意义和经济价值。对科学研究来说，就更不用说了。像生殖系统、卵巢癌、前列腺癌等相关研究，需要大...
Cas12a属于II类V-A CRISPR系统，它是用CRISPR RNA (crRNAs)编程，通过RuvC结构域特异性识别和切割dsDNA或单链DNA (ssDNA)。Cas12a在识别其目标dsDNA时，可以释放单链脱氧核糖核酸酶(ssDNase)活性，不加区分地切割附近的ssDNA(即反式切割)。基于 CRISPR/Cas12a 系统的传感方法在恒温条件下就可以进行，不需要很高的温度，在一...
Notch信号转导通路对鼻咽癌的发生、发展及维持肿瘤干细胞的自我更新等具有重要作用，既往研究方法难以使Notch通路中特定基因功能完全丧失。本研究旨在利用CRISPR-Cas9基因编辑技术构建Notch1基因敲除的CNE2鼻咽癌细胞系，并观察Notch1敲除对CNE2细胞增殖、辐射敏感性的影响。方法：采用蛋白质印迹法（Western blot）检测人鼻咽癌细胞CNE2及鼻咽正常上皮细胞NP69中N...
利用CRISPR-Cas9系统进行水稻OsMADS15基因的定向编辑
水稻 CRISPR-Cas9 基因组定点编辑 花器官 OsMADS15
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2018/12/19
CRISPR-Cas9系统的发现和应用为快速、定向的植物基因组编辑、突变体创制和开展植物功能基因组研究提供了新的技术工具。在本研究中, 我们利用CRISPR-Cas9系统, 对水稻A类MADS-box转录基因OsMADS15进行定点基因组编辑。结果显示, 该体系在T0代即获得3个不同的9522Osmads15双等位突变株系: 株系9522Osmads15-1等位1在靶点缺失1个碱基A, 等位2在靶...
生菜CRISPR/Cas9基因编辑体系的建立
生菜 农杆菌介导遗传转化 基因编辑 CRISPR/Cas9
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2018/12/26
CRISPR/Cas9基因编辑技术已经成功应用于多种植物基因组的编辑, 但是在生菜中鲜有报道。本研究拟在生菜(Lactuca sativa L.)中建立CRISPR/Cas9基因编辑体系。首先根据生菜FANCM基因序列设计靶位点, 构建Lsfancm-CRISPR/Cas9载体。然后以生菜子叶作为外植体, 通过农杆菌侵染、共培养、愈伤组织诱导、芽再生及生根培养等过程, 对生菜进行农杆菌介导的遗传转...
CRISPR/Cas系统：RNA靶向的基因组定向编辑新技术
CRISPR/Cas系统 基因组定点修饰 向导RNA
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2014/2/6
CRISPR/Cas系统广泛存在于细菌及古生菌中, 是机体长期进化形成的RNA指导的降解入侵病毒或噬菌体DNA的适应性免疫系统。对Ⅱ型CRISPR/Cas系统的改造使其成为继锌指核酸酶(ZFNs)和TALE核酸酶(TALENs)以来的另一种对基因组进行高效定点修饰的新技术, 与ZFNs和TALENs相比, CRISPR/Cas系统更简单, 并且更容易操作。文章重点介绍了Ⅱ型CRISPR/Cas系统...