搜索结果: 61-75 共查到“兽医学 ELISA”相关记录120条 . 查询时间(0.14 秒)
猪支气管败血波氏杆菌菌毛fimD基因的克隆表达及间接ELISA检测方法的建立
猪 支气管败血波氏杆菌 菌毛fimD基因 克隆表达
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2009/6/11
参照GenBank上支气管败血波氏杆菌的菌毛fimD基因序列（X75811），设计1对引物，从本实验室分离鉴定的猪源支气管败血波氏杆菌中扩增出fimD编码区1 098 bp的片段，将其克隆至原核表达载体pET-28a，转化到大肠杆菌BL21（DE3）中进行融合表达。SDS-PAGE和Western blot 检测证实该表达产物以包涵体形式存在，大小约42 ku，与用支气管败血波氏杆菌菌体制备的阳性...
利用反转录聚合酶链式反应(RTPCR)从猪囊尾蚴中克隆到18 ku蛋白基因，将扩增产物与pGEMT Easy载体连接后测序分析。将目的基因亚克隆至表达载体，构建重组质粒pGEXCE18，经转化大肠杆菌BL21（DE3）后诱导表达，用SDSPAGE和Westernblot分析表达产物。表达的目的蛋白纯化后作抗原建立检测猪囊虫抗体的重组蛋白间接ELISA方法。结果表明，18 ku 蛋白基因在...
【目的】对大肠杆菌AcrAB外排泵系统acrA、acrB基因进行原核表达，获得的表达产物AcrA、AcrB蛋白分别免疫兔，制备相应的抗体，建立大肠杆菌外排泵表达水平的ELISA检测方法。【方法】扩增AcrAB外排泵系统acrA、acrB基因片段，扩增片段分别与原核表达载体 pET-41a(+)连接构建重组质粒，于BL21（DE3）中进行诱导表达。表达产物AcrA、AcrB纯化后分别免疫新西兰大白兔...
禽波氏杆菌免疫荧光检测和抗体检测ELISA方法的建立与应用
禽波氏杆菌 OMP 间接ELISA 间接免疫荧光（IFA）
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2009/2/25
采用改良的Wooldridge法提取了禽波氏杆菌外膜蛋白（OMP），通过Bradford方法测定禽波氏杆菌OMP含量为320 μg/mL，SDSPAGE电泳检测发现禽波氏杆菌P5株OMP含有5种成分，相对分子质量分别为58、47、41、36、24 ku；P8株OMP含有6种成分，相对分子质量分别为58、47、41、38、21、16 ku。将提取的禽波氏杆菌OMP免疫健康青紫兰兔，每周免疫1次，共...
伪狂犬病强弱毒重组GE-ELISA鉴别诊断技术
伪狂犬病 ELISA重组 Ge抗原
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2008/12/17
用重组杆状病毒高效表达的猪伪狂犬病毒gE蛋白作为抗原建立的ELISA诊断方法可以区分伪狂犬病强毒感染猪和gE基因缺失弱毒疫苗免疫猪。此方法只检测抗gE蛋白的抗体。gE基因缺失弱毒疫苗免疫的猪不产生抗gE蛋白抗体，因此，结果是阴性。所有伪狂犬病野毒(或强毒)均有gE 基因，野毒感染的猪通常会产生抗gE抗体，所以此方法检测的结果是阳性。国内用于伪狂犬病诊断的主要是病毒中和试验、乳胶凝聚试验和全病毒抗原...
AIV NP基因在噬菌体表面的展示及间接ELISA方法的建立
禽流感病毒 核蛋白 T4噬菌体 展示 T4-NP-ELISA
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2008/12/11
利用DNA重组技术，将禽流感病毒(AIV)核蛋白基因片段克隆重组于溶菌酶缺陷噬菌体T4-z1，获得重组噬菌体T4-z1-NP。经SDS-PAGE和Western blot检测证实，AIV核蛋白成功地在T4噬菌体表面展示。以T4-z1-NP为抗原建立了检测禽流感抗体的酶联免疫吸附试验 (T4-NP-ELISA)方法。其与琼脂免疫扩散试验(AGP)的相对灵敏度为100%，特异性为87.62%，T4-N...
非洲马瘟病毒VP7基因拼接、表达及重组ELISA方法的建立与初步应用
非洲马瘟 基因拼接 重组ELISA
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2008/12/11
采用人工拼接的方式拼接了非洲马瘟病毒(AHSV)含有绝大多数线性抗原表位的VP7编码基因片段，克隆于pET-30a构建重组质粒pET-30a-VP7，将pET-30a-VP7转化BL21(DE3)，经1.0 mmol/L IPTG 诱导，外源基因以包涵体的形式获得高效表达。通过Dot-ELISA以及ELISA试验证明表达产物具有良好的反应原性。以纯化后表达产物作为诊断抗原包被酶标板建立了检测AHS...
磺胺类药物多克隆抗体的制备与ELISA检测方法的初步研究
磺胺类药物 多残留检测 多克隆抗体 ELISA
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2008/12/11
模拟磺胺母核结构合成了3种人工免疫原，免疫新西兰白兔，用间接竞争ELISA方法监测免疫效果。选择抑制效果较好的2组多抗血清建立磺胺类药的ELISA检测方法，绘制竞争标准曲线，并进行添加回收试验。结果表明：A组多克隆抗体对6种常用磺胺药SMD、SMM、SMZ、SDM、SDM′、SD的IC10分别为0.010、0.046、0.010、0.100、0.067、0.019 μg/mL，低于最高残留限量(0...
H3N2亚型猪流感病毒重组HA1蛋白间接ELISA诊断方法的建立
猪流感病毒 HA1蛋白 间接ELISA
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2008/12/1
以pMD18-HA质粒为模板，PCR 扩增HA1基因片段并与pET30a连接后，转化宿主菌BL21（DE3），IPTG诱导表达HA1蛋白，对表达蛋白进行SDS-PAGE及Western blotting检测。结果表明，表达的重组HA1蛋白具有良好的反应原性，分子量约为45 ku。表达产物经过纯化作为包被抗原建立了检测H3亚型猪流感抗体的间接ELISA方法。该方法具有较高的特异性和敏感性，重复性良好...
H3N2亚型猪流感重组HA1蛋白间接ELISA诊断方法的建立
猪流感病毒 HA1蛋白 间接ELISA
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2008/12/1
以pMD18-HA质粒为模板，PCR 扩增HA1基因片段并与pET30a连接后，转化宿主菌BL21（DE3），IPTG诱导表达HA1蛋白，对表达蛋白进行SDS-PAGE及Western blot检测。结果表明，表达的重组HA1蛋白具有良好的反应原性，分子量约为42 ku。表达产物经过纯化作为包被抗原建立了检测H3亚型猪流感抗体的间接ELISA方法。该方法具有较高的特异性和敏感性，重复性良好，通过检...
抗磺胺类药物多克隆抗体的制备与ELISA检测方法的初步研究--修改稿
磺胺类药物 多残留检测 多克隆抗体 ELISA
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2008/12/1
摘 要：模拟磺胺母核结构合成了三种人工免疫原，免疫新西兰白兔，间接竞争ELISA监测免疫效果。选择抑制效果较好的两组多抗血清建立磺胺类药的ELISA检测方法，绘制竞争标准曲线，并进行添加回收试验。结果表明：A组多克隆抗体对6种常用磺胺药SMD、SMM、SMZ、SDM、SDM’、SD的IC10分别为0.010、0.046、0.010、0.100、0.067、0.019 μg• mL -...
口蹄疫3A蛋白间接ELISA诊断试剂盒
口蹄疫 ELISA诊断试剂盒
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2008/11/21
试剂盒关键技术包括：口蹄疫3A基因的RT-PCR扩增；口蹄疫3ABC基因的克隆及序列分析；口蹄疫3A蛋白基因重组表达质粒构建；口蹄疫3A蛋白基因在大肠杆菌中表达等。该试剂盒具有较好的特异性、灵敏性、稳定性，可以区分口蹄疫病毒感染抗体和疫苗免疫抗体，具有较好的应用前景。
兽药对盐酸克伦特罗ELISA检测的干扰
兽药 ELISA 盐酸克伦特罗
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2008/11/14
本研究对78种常用兽药进行酸克伦特罗ELISA检测的干扰分析试验，发现7种兽药对RANDOX SU2148试剂盒存在明显的干扰现象，动物体内试验表明这7种药物经代谢后仍对检测工作存在干扰情况；本项目比较了国内现常用的两种试剂盒RANDOX SU2148和R-Biopharm R1701在检测、应用中对兽药的特异性情况；本研究对养殖企业生产实际用药和进出境检验工作都具有重要指导意义。
该成果首次对牛结核分枝杆菌哺乳动物细胞侵入蛋白（Mce4 E）和牛结核分枝杆菌复苏因子C进行体外重组表达，并应用于牛结核分枝杆菌诊断抗原的研究，同时我们也对牛结核分枝杆菌优势血清蛋白MPB83进行了研究，创造性的将三种重组融合蛋白进行抗原包被，建立了牛结核病间接ELISA诊断方法，大大的提高了ELISA诊断试剂盒的特异性和敏感性，从而兼顾快速、便捷的同时增加了诊断的可靠性。
禽流感病毒的单克隆抗体ELISA检测技术
禽流感 单克隆抗体 ELISA
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2008/11/5
该技术是利用自我筛选的具有群特异性的针对禽流感核蛋白的单克隆抗体作为捕获抗体，以禽流感病毒的多抗和酶标鼠抗鸡单抗为结合和显示抗体建立的可以一次检测所有亚型禽流感病毒的夹心抗体ELISA技术。该技术用于检测禽流感病毒，不会与新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡产蛋下降综合症病毒等发生交叉反应，可以检出包括H5、H7和H9亚型的禽流感病毒，其最低检测限量可以达到10ug/ml。