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搜索结果: 1-15 共查到园艺学 cDNA相关记录37条 . 查询时间(0.191 秒)
类钙调磷酸酶B亚基蛋白CBL(calcineurin B-like protein)与其互作蛋白激酶CIPK(CBL-interacting protein kinase)组成的CBL-CIPK系统,在真核生物钙信号转导及各种胁迫应答途径中发挥重要作用。采用SMART与LD-PCR技术构建了山葡萄‘双丰’(Vitis amurensis Rupr. ‘Shuangfeng’)叶片组织低温胁迫下的均...
土壤盐渍是限制杜鹃属(Rhododendron L.)植物分布与园林应用的主要因素之一。为探究杜鹃在盐胁迫中的抗性分子机理,以2个杜鹃品种‘江南春早’(R.‘Jiangnan Chunzao’)和‘胭脂密’(R. obtusu‘Yanzhi Mi’)为材料,进行盐胁迫处理,然后采用cDNA-SCoT的方法进行差异表达基因的筛选。结果表明,40个引物能够扩增出90多条带,其长度在100 ~ 1 80...
NPR1是水杨酸诱导抗病基因表达的重要调控因子之一,主要作用于水杨酸信号转导途径的上、下游。采用稀释池PCR法,筛选U+3B8F(Prunus salicina var. cordata)叶片全长均一化cDNA文库,分离U+3B8F叶片NPR1同源基因的全长cDNA;用不同浓度的水杨酸喷施一年生U+3B8F嫁接苗嫩叶,采用荧光定量PCR技术检测所获得的NPR1同源基因的表达量差异。试验结果表明,共...
为了研究柑橘衰退病晚期应答的分子机理,利用经典的抑制差减杂交技术,以感染柑橘衰退病3年后的‘不知火’杂柑实生苗叶片组织的cDNA为测试方,以脱毒的‘不知火’实生苗叶片组织的cDNA为驱动方进行差减杂交,构建了柑橘衰退病诱导的正向抑制差减cDNA文库。随机挑取此文库中210个阳性克隆进行测序,获得了192条有效序列。将这些EST序列聚类拼接后,共获得77条非重复序列。对这些EST进行GO和KEGG分...
为了分离和克隆辣椒中疫霉菌诱导基因,以接种辣椒疫霉菌的叶片为材料,利用SMART 技术构建辣椒疫霉菌与辣椒互作的双杂交cDNA 文库。结果表明:该文库容量为3.6×106 cfu,重组率88%左右,插入片段集中在300~2 000 bp 之间,平均长度约为800 bp,表明获得的文库质量较高,该文库将为分子育种提供重要的基因资源。
通过RT-PCR和RACE的方法得到了编码‘津田’芜菁(Brassica rapa L. ssp. rapifera‘Tsuda’)BrCOP1的cDNA序列,长2 034 bp,编码677个氨基酸,与拟南芥同源性达94%,命名为BrCOP1,GeneBank收录号为JF738111。Northern杂交分析表明BrCOP1的表达没有组织特异性,而在整株幼苗及成熟植株肉质根表皮中受长波紫外线(UV...
利用RT-PCR 结合RACE 技术,从川乌头(Aconitum carmichaeli Debx.)花朵中克隆到1 个类黄酮–3′,5′–羟基化酶基因的cDNA 全长序列,全长1 720 bp,包含1 个编码506 个氨基酸的开放阅读框,命名为Ac-F3′5′H(GenBank 登录号:JN635708)。序列分析表明Ac-F3′5′H 编码的氨基酸序列中包含有已确定的保守基序,包括CYP 基序...
为了挖掘安白茶白化期相关的差异基因,建立并优化了茶树叶片cDNA-AFLP扩增反应体系,进行cDNA-AFLP分析。在安吉白茶叶片cDNA-AFLP的试验中,分别对20 μL预扩增和选择性扩增反应体系中的4种反应条件影响因子进行不同梯度优化的研究,包括引物、Mg2+、dNTP及Taq DNA聚合酶的用量。PCR预扩增20 μL反应体系中,引物75 ng/20 μL,Mg2+ 2.0 mM,dNTP...
应用抑制消减杂交技术(Suppression subtractive hybridization,SSH)分离‘安吉白茶’全白期与全 绿期叶片差异表达基因,成功构建了‘安吉白茶’白期叶与绿期叶的正、反向消减文库。随机挑选80 个 阳性克隆测序,通过BLASTX比对分析,80 个序列中有30 个没有找到任何同源序列,8 个序列太短,且 同源性不高,42 个序列与已知蛋白有着或高或低的同源性。其...
通过PCR扩增了桃的PGIP基因及cDNA序列,并进行了序列之间的比对及分析。结果表明,桃的PGIP基因全长1 092 bp,而其cDNA序列只有1 045 bp,PGIP基因中含有一段长147 bp的内含子,且内含子符合GTAG规律。这与其他核果类植物的PGIP基因构成基本相同。其基因序列与GenBank中已登录的3个桃以及其他核果的序列比对,其同源性达92%~99%;与苹果、梨和大桉的同源性...
采用IEF-SDS-PAGE双向电泳技术,对‘立冬本'龙眼合子胚发育不同时期的蛋白质进行分离,通过MALDI-TOF-TOF鉴定到其中一个上调差异表达的蛋白为黄烷酮-3-羟化酶 (flavanone 3-hydroxylase,F3H)。以‘立冬本’龙眼胚胎cDNA为模板,采用RT-PCR和RACE技术,获得F3H基因cDNA 1 404 bp全长序列。序列分析表明,F3H基因共编码365个氨基酸...
以拟南芥C-8, 7甾醇异构酶的氨基酸序列为信息探针搜索GenBank数据库, 对高度同源的马铃薯EST序列进行拼接、引物设计和RT2PCR扩增, 扩增产物测序结果证实获得一个马铃薯C-8, 7甾醇异构酶基因(StSI1) 的全长cDNA序列。序列分析结果显示, StSI1全长886 bp, 包含59 bp的5′非编码序列、161 bp的3′非编码序列和一个长度为666 bp编码221个氨基酸的开...
根据物种间同源基因相对保守的特点,利用生物信息学方法以拟南芥APETALA2 cDNA序列作为模板,对柑橘EST数据库进行同源检索筛选,克隆了柑橘APETALA2基因的cDNA序列,并以枳[Poncirus trifoliata (L.) Raf.]花cDNA为模板,根据以上cDNA序列设计特异引物,利用RACE技术分别获得该基因的5'和3'末端,序列拼接后获得枳的APETALA2 cDNA全长。...
一种改良的扩增cDNA 5′末端的方法     TdT  RACE  降落PCR        < 2009/8/4
介绍一种改良的扩增基因5′cDNA序列的方法(改良TdT加尾扩增法),该方法以龙眼为材料采用了TdT(末端脱氧核苷酸转移酶)加尾、锚定PCR、巢式PCR、降落PCR等多种策略。通过与常规方法(用TaKaRa试剂盒)的对比试验,发现该方法原理简单,操作性强;扩增特异性高,结果真实可靠;同时还具有快速低廉的特点,适合于在一般实验室中推广使用。
[目的]为进一步研究糖运输蛋白的功能、作用机理奠定基础。[方法]以嘎啦苹果叶片总RNA为模板,根据报道的山梨醇转运子的保守区设计引物,对山梨醇转运子cDNA片段的PCR扩增, PCR产物的克隆和测序和序列分析。[结果]经RTPCR获得一条长度为581bp的片段,回收并进行测序,该片断编码181个氨基酸。应用Blastn和Blastx软件,通过与GenBank蛋白数据库比对分析发现其蛋白序列与...

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