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人COX-2基因反义真核表达载体的构建及对SGC-7901细胞增殖的影响
人 COX-2基因 反义真核表达载体 SGC-7901细胞增殖
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2009/6/15
背景与目的： 构建人COX-2基因反义真核表达载体,研究COX-2基因对人胃癌细胞株SGC-7901增殖的影响。 材料与方法： 采用分子克隆技术,用EcoR Ⅰ从含人全长COX-2基因的质粒pBOSNeoCOX-2中切下含COX-2 cDNA的目的片段,然后分别在其两端添加EcoR Ⅰ和Bgl II酶切位点,酶切后将该片段按正、反两个方向插入真核表达载体pIRES2-EGFP的多克隆位点中,琼脂糖...
背景与目的： 研究c9,t11-共轭亚油酸(c9,t11-CLA)抑制人胃腺癌细胞(SGC-7901)中基质金属蛋白酶(MMP-2 和 MMP-9)的表达与亚油酸代谢途径中限速酶COX-2的关系。 材料与方法： 实验设200、100、50和25 μmol /L的c9,t11-CLA 4个剂量组，利用RT-PCR分别检测加入COX-2的选择性抑制剂NS-398前后SGC-7901细胞中MMP-2 和...
目的: 构建COX-2基因启动子荧光素酶报告基因重组质粒pGL3-Basic-COX-2-promoter, 并进行功能鉴定. 方法: 根据已知人的COX-2基因启动子序列设计两端引物, 扩增人基因组DNA中的COX-2启动子. 载体质粒pGL3-Basic和COX-2启动子分别用限制性内切酶Hind Ⅲ和Bgl Ⅱ双酶切, 将COX-2基因启动子插入到pGL3-Basic报告载体中. 构建的pG...
目的: 探讨土槿皮乙酸(PAB)对人肝癌细胞株BEL-7402增殖和凋亡的影响及其影响机制. 方法: 体外培养肝癌BEL-7402细胞, 用不同浓度PAB作用不同时间后, MTT比色法检测PAB对细胞增殖的影响; 流式细胞仪分析PAB对细胞周期和凋亡的影响; 吖啶橙染色荧光显微镜下观察PAB引起的肝癌细胞株BEL-7402形态学变化; JC-1检测线粒体膜电位的变化; Western blot方法...