搜索结果: 16-30 共查到“兽医学 猪圆环病毒2型”相关记录44条 . 查询时间(0.078 秒)
猪细小病毒和猪圆环病毒2型二重液相芯片检测方法的建立
猪细小病毒 猪圆环病毒2型 二重液相芯片 检测
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2013/12/2
作者拟建立检测猪细小病毒（PPV）和猪圆环病毒2型（PCV2）的二重液相芯片（xMAP）检测方法，以满足出入境检疫和临床高通量检测的要求。依据GenBank中PPV结构蛋白VP2基因及PCV2全基因序列，设计PPV和PCV2特异性探针、引物及探针互补序列，将探针与磁性微球偶联，对下游引物和探针互补序列标记生物素，采用不对称性二重PCR扩增靶序列，将PCR产物与偶联好的探针进行杂交，用液相芯片仪进行...
猪圆环病毒2型毒株分离鉴定和体外增殖特性研究
猪圆环病毒2型 分离 鉴定 增殖特性
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2012/2/13
为分离鉴定猪圆环病毒2型(PCV2)毒株并研究其体外增殖特性,本研究采用PCR法分别对从山东、山西、北京和河北收集的疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)病猪的病料进行检测,将检测结果为PCV2阳性的病料处理后接种PCV阴性的PK15A细胞连续传代进行病毒分离,观察每代细胞是否有病变,采用PCR、间接免疫荧光法(IFA)对第3代培养物进行鉴定,对各毒株的全基因组进行克隆、测序和系统进化分析,并将...
猪圆环病毒2型Cap蛋白的表达及在ELISA中的初步应用
圆环病毒2型 Cap蛋白 间接ELISA
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2013/12/3
本研究旨在建立以PCV2 Cap蛋白为包被抗原的间接ELISA检测方法，构建猪圆环病毒2型（PCV2）ORF2基因原核表达质粒pET32aORF2并转化至Rosetta菌，在1.0 mmol·L-1 IPTG和37 ℃条件下诱导下，Cap蛋白获得高效表达，Western blot检测证实其具有免疫反应活性，以纯化的蛋白为抗原建立了检测猪圆环病毒2型抗体的间接ELISA方法。结果表明抗原最适包被浓...
【目的】猪圆环病毒2型（PCV2）是引起断奶仔猪多系统衰竭综合症（PMWS）的重要病原,其基因组ORF2编码的Cap蛋白为病毒的主要结构蛋白,起保护性抗原作用,对其进行抗原表位鉴定十分必要。【方法】本研究采用杆状病毒表达的重组Cap蛋白作为免疫原制备5株单克隆抗体,通过原核表达系统对ORF2基因进行了截短表达,先行对Cap蛋白抗原表位进行宽幅定位,然后利用合成多肽对Cap抗原表位做精确扫描定位。【...
一株类猪圆环病毒2型因子P1的全基因组序列测定与分析
猪圆环病毒2型 P1 全基因组 序列测定与分析
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2010/3/16
【目的】确定猪体内存在与猪圆环病毒2型核苷酸序列高度同源的因子。【方法】首先利用PCR方法对来自临床表现为猪断奶后多系统衰竭综合征的猪血清所抽提的DNA进行扩增,根据获得的序列再设计引物进行反向PCR,拼接得到类猪圆环病毒2型因子P1的全基因组序列,最后根据P1全基因组序列设计引物扩增其全基因组加以验证。【结果】首次完成了类猪圆环病毒2型因子P1的全基因组序列测定。测序结果表明P1因子为环状DNA...
一株类猪圆环病毒2型因子P1的全基因组序列测定与分析
猪圆环病毒2型 P1 全基因组 序列测定与分析
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2010/2/21
【目的】确定猪体内存在与猪圆环病毒2型核苷酸序列高度同源的因子。【方法】首先利用PCR方法对来自临床表现为猪断奶后多系统衰竭综合征的猪血清所抽提的DNA进行扩增,根据获得的序列再设计引物进行反向PCR,拼接得到类猪圆环病毒2型因子P1的全基因组序列,最后根据P1全基因组序列设计引物扩增其全基因组加以验证。【结果】首次完成了类猪圆环病毒2型因子P1的全基因组序列测定。测序结果表明P1因子为环状DNA...
中国部分地区猪圆环病毒2型的基因型分析
猪圆环病毒2型 分子流行病学 PCV2a PCV2b
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2009/10/15
对中国11个省（市）部分猪场收集的812份病料，应用ORF2PCR进行检测，发现有235份为PCV2阳性病料。利用鉴别PCR方法从235份阳性病料中，检出10份PCV2a基因型和133份PCV2b基因型，检出率分别为4.2%、56.6%。进一步对ORF2PCR检测阳性的部分模板进行全基因组扩增，构建阳性重组质粒，对插入质粒的片段进行测序鉴定，利用DNAStar进行同源性分析，同GenBank参...
中国部分地区猪圆环病毒2型的基因型分析
猪圆环病毒2型 分子流行病学 PCV2a PCV2b
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2013/12/9
对中国11个省（市）部分猪场收集的812份病料，应用ORF2PCR进行检测，发现有235份为PCV2阳性病料。利用鉴别PCR方法从235份阳性病料中，检出10份PCV2a基因型和133份PCV2b基因型，检出率分别为4.2%、56.6%。进一步对ORF2PCR检测阳性的部分模板进行全基因组扩增，构建阳性重组质粒，对插入质粒的片段进行测序鉴定，利用DNAStar进行同源性分析，同GenBank参...
2007年中国部分地区猪圆环病毒2型分子流行病学分析
猪圆环病毒2型 开放阅读框架2 基因型
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2009/9/1
【目的】对采集自上海、江西、山东、江苏、河南和湖南等省的257份进行了PCV2的检测,确定中国PCV2感染情况及分子特征。【目的】设计一对针对PCV2 ORF2的引物,利用PCR对其进行PCV2基因组的检测,对PCV2阳性的样品,进行了ORF2的克隆、序列测定和分析。【结果】结果显示PCV2阳性率为24.51%（63/257）,并能从健康猪群中检测的阳性;各PCV2分离株间ORF2核苷酸序列同源性...
为了评估酵母表达的PCV2 Cap蛋白在猪体的免疫特性以及猪α干扰素对其的免疫佐剂效果，将酵母表达的PCV2 Cap蛋白配比适量的铝胶或重组猪α干扰素制成亚单位疫苗。30日龄仔猪分别接种铝胶佐剂亚单位疫苗和猪α干扰素佐剂亚单位疫苗，同时设攻毒对照与空白对照，首免后21 d加强免疫，二免后14 d用PCV2 JS 株攻毒。铝胶佐剂亚单位疫苗免疫猪体后产生了PCV2特异性中和抗体。猪α干扰素佐剂亚单位...
检测猪圆环病毒2 型PCR方法的建立
PCR 检测 猪圆环病毒2 型
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2009/6/16
[ 目的] 为快速诊断猪圆环病毒病提供参考。[ 方法] 根据GenBank 中猪圆环病毒2 型( PCV-2) 的核苷酸序列设计并合成1 对特异
性引物, 建立诊断PCV-2 地方分离株的PCR 方法。[ 结果] 各物质在PCR 反应中最佳浓度分别为:dNTP220 pmol/ ml , Taq 酶0 .1 U/ μl , 引物20 pmol/ μl 。从PCV-2 阳性病料中提取DNA, 在...
将猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）和猪圆环病毒2型（PCV2）单感染和共感染6周龄健康仔猪，采用Real-time PCR技术对外周血单个核细胞（PBMC）中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α等促炎细胞因子的mRNA表达进行定量分析。结果表明，病毒感染后，PRRSV感染组、PCV2感染组IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α的mRNA表达水平均上调，其中PRRSV感染组的IL-6、...
猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型共感染对猪体内病毒动态及免疫反应的影响
猪繁殖 呼吸综合征病毒 猪圆环病毒
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2009/6/11
将猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪圆环病毒2型（PCV2）单感染和共感染6周龄健康仔猪，采用实时定量PCR（Realtime PCR）对血清、组织（心、肝、肺、肾、胰、脾、胸腺、扁桃体、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结）中的PRRSV和PCV2载量进行检测，分别采用间接ELISA和间接IFA对血清中的PRRSV和PCV2特异性抗体进行检测，采用MTT法对猪外周血淋巴细胞（PBLC）的增殖能力进...
采用竞争定量RT-PCR技术（qcRT-PCR）对PCV2感染组和健康对照组外周血淋巴细胞中IL-2、IL-4、IL-10、IL-12p40、IFN-γ和TNF-α的mRNA转录水平进行分析。结果表明，在14和21 DPI(Days post inoculation)感染组Th1类细胞因子IL-2 mRNA转录水平分别为对照组的5.1（P<0.01）和24.0（P<0.01）倍；IL-12p40 ...
猪圆环病毒2型-伪狂犬重组病毒活疫苗SA215(C)株的构建
猪圆环病毒2型 伪狂犬重组病毒 活疫苗SA215(C)株
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2009/6/11
根据GenBank发表的猪圆环病毒2型（PCV2）序列设计一对特异性引物，采用PCR方法，扩增PCV2 ORF2基因，将ORF2基因插入到含有EGFP报告基因的转移载体质粒pPI-2.EGFP，获得重组中间转移质粒pPI-2.EGFP-ORF2。采用脂质体介导法，将重组中间转移载体pPI-2.EGFP-ORF2与伪狂犬病毒SA215株基因组共转染真核ST细胞，通过空斑纯化得到表达PCV2 ORF2...