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大鼠肺微血管内皮细胞的体外分离培养与纯化
大鼠 肺微血管内皮细胞 体外分离培养 免疫磁珠纯化
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2016/10/31
旨在建立一种简单易行、获得细胞纯度较高的体外分离、培养大鼠肺微血管内皮细胞的方法。取5~7日龄SD大鼠分离外周肺组织，组织植块法获得原代大鼠肺微血管内皮细胞，37 ℃、5% CO2 培养箱中传代培养，采用免疫磁珠法对其进行分离纯化，并对分离纯化后的细胞进行免疫荧光及流式细胞鉴定，通过MTT比色分析法准确、安全、可靠地检测纯化后传代肺微血管内皮细胞的增殖情况。结果显示：倒置显微镜下观察单个细胞呈短梭...
用新疆野生一枝蒿粗多糖（wild Artemisia rupestris L.crude polysaccharides，WARCP）通过肌肉注射免疫小鼠，研究其作为流感病毒疫苗（influenza virus vaccine，IVV）的佐剂效果和节约流感疫苗抗原用量的作用。WARCP与不同剂量（0.05、0.1、0.5 μg）的IVV配伍，肌肉注射免疫小鼠，观察小鼠的生长状态，通过ELISA法检...
竹鼠源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及致病性分析
竹鼠,弗氏柠檬酸杆菌,分离鉴定,组织病理学观察
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2017/5/25
为确定桂林某竹鼠养殖场患病竹鼠的病原，从发病竹鼠肝组织分离到一株细菌。根据形态学特征及16S rRNA基因序列分析，确定分离菌株为弗氏柠檬酸杆菌。进化分析显示，该菌与来自棉花红蜘蛛的弗氏柠檬酸杆菌遗传关系最近，但处于独立的分支上。毒力试验结果表明，该菌对成年小白鼠的LD50为2.8×108 CFU，对10~20日龄的竹鼠LD50为6.3×108 CFU。药敏试验结果显示，分离菌株对头孢曲松、庆大霉...
旨在研究乳酸链球菌素（nisin）对应激性腹泻导致的肠道菌群与脑-肠轴功能之间的相关性，进一步揭示nisin对单胺类神经递质的调控机制。通过注入3种血清型大肠杆菌混合菌悬液（1∶1，1.0×109 CFU•mL－1）制备小鼠腹泻模型，并用nisin和蒙药复方进行治疗；在造模后0、 72 h，ELISA检测5-HT、DA和NE水平，以及平板涂布法将盲肠内容物分别10倍稀释成8个梯度涂布于...
本研究以原核注射法生产的乳腺特异性表达PRL基因小鼠为模型，从外源基因遗传完整性、拷贝数和插入位点3方面对其进行遗传性状分析，为今后大型转基因动物的选育提供基础。采用基因组DNA PCR方法筛选发生外源基因片段部分缺失的小鼠，并进行Southern blot验证，以检测外源基因的遗传完整性；用绝对荧光定量PCR方法测定外源基因拷贝数，用Genome walking方法分析外源基因整合位点。结果显示...
旨在深入研究小鼠髓源树突状细胞（BMDC）感染牛分枝杆菌（M.bovis）后环磷酸鸟苷-磷酸腺苷合酶（cGAS）的调控作用。通过体外诱导C57BL/6骨髓细胞分化为树突状细胞，建立牛分枝杆菌感染模型，运用siRNA技术沉默cGAS基因的表达，分别设置对照组、感染组、沉默组。通过流式细胞仪检测BMDC表型变化，Western blot和免疫荧光技术检测cGAS信号通路中STING、TBK1、p-TB...
黑曲霉发酵白术对小鼠胸腺指数、脾指数及脾T淋巴细胞增殖的影响
黑曲霉 发酵白术 免疫功能 白术内酯I
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2016/7/26
旨在研究黑曲霉发酵白术对小鼠免疫功能的影响。利用环磷酰胺建立小鼠免疫抑制模型，检测黑曲霉发酵白术对小鼠胸腺指数、脾指数和脾T淋巴细胞增殖的影响。通过高效液相色谱技术（HPLC）检测白术发酵前后的有效成分变化。并通过正交试验筛选了提高白术有效成分含量的最佳发酵条件。试验结果表明：（1）黑曲霉发酵后的白术能有效提高小鼠免疫功能，其中发酵白术低、中、高剂量（0.5、1、2 g•kg-1）均能...
一种山羊支原体山羊肺炎亚种多重抗原肽的小鼠免疫试验
免疫反应 小鼠 多重抗原肽 山羊支原体山羊肺炎亚种
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2016/12/26
旨在构建一种由山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum Subsp. capripneumoniae，Mccp)六个B细胞表位和三个T细胞表位组成的多重抗原肽(multiple antigenic peptide，MAP)，将其在大肠杆菌中表达后免疫小鼠，评估其体液免疫和细胞免疫。分别用MAP、单个B细胞表位及全菌超破抗原作为抗原，检测免疫小鼠抗体水平，结果显示三种抗原均...
微囊化大肠杆菌口服灭活疫苗对大鼠免疫效果的研究
微囊包被 免疫 大鼠
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2017/4/1
不同血清型的致病性大肠杆菌是引起幼畜腹泻的主要病因之一。笔者拟对采用微囊包被技术制备的羊大肠杆菌灭活口服疫苗对大鼠的免疫效果进行评价。将制备的羊大肠杆菌蜂胶佐剂灭活苗作为芯材，天然高分子材料海藻酸钠为壁材，采用喷雾干燥法制备微囊化口服疫苗。微囊化口服疫苗的含菌量为7.52×1011菌•g－1。100只成年健康大鼠随机分为对照组、注射组和微囊包被口服疫苗组（再分为基础剂量、10倍基础剂量...
大鼠高脂血症模型建立效果评价
高脂血症 SD大鼠 高脂饮食
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2018/5/25
评价运用SD大鼠建立高脂血症动物模型的效果。方法 24只5周龄健康SD大鼠(雌雄各半)根据体重随机分为正常对照组、高脂模型组，分别饲以基础饲料、高脂饲料。于喂养的第28天、第45天麻醉各组大鼠，经眼球采血，测定血清中血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白(LDL-C)的变化。结果 在造模28天时，与对照组相比，模型组大鼠血清TC、LDL-C水平明显升...
本研究旨在了解活性氧（Reactive oxygen species，ROS）、发育阻滞与抗氧化物吡格列酮（Pioglitazone，PIO）之间的关系。试验分3组：对照组、H2O2处理组和H2O2+PIO处理组。通过H2O2建立小鼠胚胎氧化损伤模型，添加抗氧化物质PIO对胚胎进行氧化修复， DCHFDA测定胚胎内部ROS水平，半定量PCR测定母型-合子型胚胎内部相关母性效应基因和合子型基因的表达...
旨在探讨牛源犬新孢子虫对孕鼠胎盘激素和细胞因子调节功能的影响。以牛源犬新孢子虫BABL/c孕鼠感染模型为研究对象，同时设置正常对照组孕鼠，在攻虫第12、14、16、18天分批处死孕鼠，采集孕鼠血清，制备孕鼠胎盘细胞悬液，采用ELISA方法对牛源犬新孢子虫感染孕鼠血清中CRH、CG、PRL及E3等胎盘激素水平，以及孕鼠胎盘细胞悬液中IFN-γ、IL-4及TGF-β等细胞因子水平进行检测。结果显示，与...
为了探索cpxR基因对鼠伤寒沙门菌多重耐药性的调控机制，同时避免外排泵acrB的存在掩盖cpxR对其他外排泵或外膜蛋白的调控作用，利用基于Red同源重组系统的一步法失活染色体基因，用含有同源臂的线性打靶DNA片段替换目的基因，构建鼠伤寒沙门菌JS株的acrB基因缺失株JSΔacrB。然后利用噬菌体转导技术，以前期构建的cpxR缺失株JSΔcpxR∷kan为供体菌，本研究新构建的JSΔacrB为受体...
旨在探讨GnRH主动免疫雌性SD大鼠的调控机制。24只雌性SD大鼠随机分为免疫组、卵巢切除组和空白对照组（n=8），免疫组于12周龄注射疫苗，4周后加免；卵巢切除组11周龄外科手术摘除卵巢；空白对照组不作任何处理。使用放射免疫分析法测定血清激素E2、P4、FSH和LH含量，荧光定量PCR分析各基因mRNA表达情况。结果显示，主动免疫显著降低血清E2、P4、FSH和LH含量，至56周处死时，E2和L...
天鹅源丙型副伤寒沙门菌感染实验小鼠的组织病理学及抗原分布
天鹅源丙型副伤寒沙门菌 病理变化 抗原分布
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2016/9/21
为了研究天鹅源丙型副伤寒沙门菌感染致实验小鼠的组织病理学变化和其菌体抗原的组织分布，奠定菌株致病机制的研究基础，采用天鹅源丙型副伤寒沙门菌株口腔灌服感染实验小鼠，在感染后不同时点采集小鼠11个组织脏器制备石蜡切片，进行HE染色和免疫酶组织化学染色，对感染小鼠的组织病变及菌体抗原的分布进行观察。感染小鼠的心、肝、脾、肺、肾、肠道、脑等组织在感染3~6 h后开始出现炎性反应，直至感染后14 d；感染鼠...