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搜索结果: 1-13 共查到兽医学其他学科 细胞相关记录13条 . 查询时间(0.909 秒)
旨在建立能稳定表达猪GM-CSF的细胞系。本研究利用NCBI已公布猪GM-CSF基因序列设计引物,采用RT-PCR法扩增出猪GM-CSF开放阅读框(ORF)。发现其长435 bp,编码144个核苷酸的蛋白。该蛋白分子质量为16.3 ku,等电点为7.15。与绵羊、马、猫、牛、狗和人的同源性分别为77.1%、73.6%、72.2%、71.5%、71.3%和70.8%。通过EcoR I和BamH I酶...
初步探讨盐霉素对鸡原代心肌细胞的毒性作用及其毒性机制。采用差速贴壁法结合化学纯化法分离鸡原代心肌细胞,应用免疫荧光法鉴定心肌细胞纯度,给予1、5、10、20、50 μg·mL-1盐霉素处理后,观察心肌细胞形态,采用MTT法测定盐霉素对心肌细胞活性的影响;比色法检测心肌细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放、肌酸激酶(CK)活性;流式细胞术分析盐霉素对心肌细胞凋亡及线粒体膜电位的影响;电子显微镜观察盐霉素对心...
旨在深入研究小鼠髓源树突状细胞(BMDC)感染牛分枝杆菌(M.bovis)后环磷酸鸟苷-磷酸腺苷合酶(cGAS)的调控作用。通过体外诱导C57BL/6骨髓细胞分化为树突状细胞,建立牛分枝杆菌感染模型,运用siRNA技术沉默cGAS基因的表达,分别设置对照组、感染组、沉默组。通过流式细胞仪检测BMDC表型变化,Western blot和免疫荧光技术检测cGAS信号通路中STING、TBK1、p-TB...
旨在通过检测转录因子 Oct 4(Octamer-binding transcription factor 4)在牦牛(Bos grunneins)卵母细胞成熟及早期胚胎发育过程中的表达,分析Oct 4在卵母细胞与体外受精胚胎发育过程中的作用。本研究收集牦牛卵丘-卵母细胞复合体(Cumulus-oocyte complexes,COCs)对其进行体外成熟培养,生产体外受精(In vitro fer...
近日,从中国农业科学院北京畜牧兽医研究所获悉,该所畜禽资源收集、保护与创新利用团队通过生物信息学技术和方法分析了胰腺干细胞向β-细胞分化过程中的微小核糖核酸(microRNA)变化规律,发现了调节胰腺干细胞向β-细胞分化中的关键通路,从转录水平上揭示了胰岛素分泌细胞的调控机制。该研究成果于2015年12月3日在线发表于国际学术期刊《生物化学和生物物理学报-基因调控机制(BBA-Gene Regul...
为揭示LH/hCG受体和cAMP在玉米赤霉烯酮(ZEN)抑制小鼠睾丸间质细胞(leydig cells)分泌睾酮中的作用,本研究以原代培养的小鼠Leydig细胞为材料,用ELISA法分别测定ZEN暴露浓度为0、1、5、10、20 μg·mL-1及暴露时间为1、6、12、24 h时睾酮的分泌量(hCG环境及cAMP环境)和胞质内cAMP水平(hCG环境),用化学发光标记免疫分析法(CLIA)测定其细...
采用克隆测序和PCR-SSCP方法对民猪COXⅠ基因序列及多态性进行了检测与分析, 采用 实时荧光定量PCR法对同一饲养水平下经冷诱导处理的民猪和长白猪肌肉、肝脏组织中COXⅠ 基因的表达变化进行分析。结果表明:民猪的COXⅠ基因序列与其他猪种相比,存在18个核 苷酸突变,导致5个氨基酸发生变化;C260T、G275A和C1253T位点民猪以B等位基因占优势,大 白猪、长白猪、北京黑猪、野猪则是A...
应用Grimelius法对极北鲵(Salamandrella keyserlingii)、东北小鲵(Hynobius leechii )两种动物消化道嗜银细胞的分布密度及形态进行了比较研究。结果显示:嗜银细胞在两种动物消化道各部分均有分布,但分布密度高峰不同:极北鲵消化道嗜银细胞在直肠部分布密度最高,胃体处最低;而东北小鲵在胃幽门部分布密度最高,在食管处最低。其形态和分布位置相似,嗜银细胞形态有圆...
分离培养梅花鹿鹿茸间充质层细胞和前成软骨层细胞,通过研究TGF-β的特异性小分子拮抗剂SB-431542对这两种细胞增殖的影响,探讨TGF-β在鹿茸间充质层细胞和前成软骨层细胞增殖与分化中的调节机制。从生长30天的梅花鹿鹿茸中分离间充质层细胞和前成软骨层细胞,进行体外培养,将传代培养第2代的间充质层细胞和前成软骨层细胞分别在含不同浓度SB-431542(0、1、3、5、8、10 μmol/L)的培...
本试验以阿维菌素染毒原代培养的王鸽脑神经细胞为模型,观察阿维菌素对神经细胞凋亡的毒性作用和一氧化氮产生量的影响。采用原位末端标记法观察细胞凋亡,四唑盐比色法检测神经细胞相对存活率,流式细胞术检测凋亡细胞百分比,分光光度法测定细胞一氧化氮的产生量。结果显示,阿维菌素可诱导神经细胞凋亡和细胞坏死,并具有随着阿维菌素剂量递增而增加的趋势,同时阿维菌素也能引起一氧化氮产生量降低,但是未发现存在剂量效应关系...
通过同源重组将pHA2质粒插入到牛Ⅰ型疱疹病毒ZJ分离株基因组的UL15和UL18基因之间, 构建了重组病毒rBHV1-HA; 提取重组病毒的环状基因组DNA, 转化大肠杆菌DH10B, 获得了含有BHV1全基因组的感染性细菌人工染色体克隆pBHV1. pBHV1转染MDBK细胞可以拯救出病毒, 该病毒与野生毒株在细胞上的繁殖特性未见差异. 通过两步Red E/T重组, 构建了gN基因跨膜区缺失的...
本研究旨在观察羊驼睾丸的出生后发育和精子发生过程中的细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl2和Caspase3的定位。取材新生、12月龄和24月龄羊驼的睾丸,用TUNEL法检测睾丸发育和精子发生过程的细胞凋亡,用免疫组织化学技术检测凋亡相关蛋白Bcl2和Caspase3在羊驼出生后发育和精子发生过程中的定位。结果显示在新生羊驼睾丸未检测到TUNEL阳性细胞,Caspase3和Bcl2表达于间质细胞,提示在新...
以体外染毒法对星豹蛛雌雄成蛛进行过氧化氢和甲醛染毒处理,采用单细胞凝胶电泳技术检测蜘蛛血细胞DNA损伤效应,用CASP软件分析彗星图像,并计算受损伤细胞率、彗星尾长和Olive尾矩。结果表明,不同浓度的过氧化氢能引起蜘蛛血细胞DNA断裂损伤,且损伤程度与浓度之间有明显的剂量---效应关系;不同浓度的甲醛能引起蜘蛛血细胞DNA损伤,其中在10µM时引起DNA断裂,在25µM、...

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