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不同处理牛卵丘/颗粒细胞作为核供体对克隆胚发育的影响
牛卵丘/颗粒细胞 核供体 克隆胚发育
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2009/6/11
本研究利用TSA (Trichostatin A)、ROS (Roscovitine)、血清饥饿和接触抑制方法处理牛卵丘/颗粒细胞，检测处理前后细胞乙酰化水平、周期分布及其对重组胚发育能力的影响，为提高核移植效率提供理论基础。分别采用上述方法处理牛卵丘/颗粒细胞，首先对处理的细胞形态及活率进行观察，并利用流式分选技术检测处理细胞的周期分布，再通过间接免疫荧光法检测经上述不同处理前后细胞乙酰化水平变...
不同处理牛卵丘/颗粒细胞作为核供体对克隆胚发育的影响
牛 卵丘/颗粒细胞 乙酰化 克隆胚
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2013/12/9
本研究利用TSA (Trichostatin A)、ROS (Roscovitine)、血清饥饿和接触抑制方法处理牛卵丘/颗粒细胞，检测处理前后细胞乙酰化水平、周期分布及其对重组胚发育能力的影响，为提高核移植效率提供理论基础。分别采用上述方法处理牛卵丘/颗粒细胞，首先对处理的细胞形态及活率进行观察，并利用流式分选技术检测处理细胞的周期分布，再通过间接免疫荧光法检测经上述不同处理前后细胞乙酰化水平变...
细胞凋亡是雌性生殖系发育过程中的一个重要组成部分, 在哺乳动物中, 超过99% 的雌性生殖细胞都会在卵子发生的不同阶段
发生凋亡。目前, 在颗粒细胞凋亡过程中至少发现5 个配体受体系统:TNFa 和TNF 受体系统,Fas 配体受体系统,TRAIL 和TRAIL 受体系
统,APO-3 配体受体系统,PFG-5 配体受体系统, 而且发现颗粒细胞凋亡属于依赖于线粒体凋亡信号传导凋亡途径。
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为了解水牛有腔卵泡闭锁的起因和有腔卵泡中是否存在卵泡颗粒细胞凋亡，本研究选择青春期前水牛和成年（发情间期和发情期）水牛的卵巢，采用石蜡组织切片、HE染色技术进行光镜观察，并采用DNA原位末端标记（TUNEL）技术和透射电镜观察研究了卵泡颗粒细胞凋亡的特征。结果表明：青春期前水牛的健康有腔卵泡上无或仅有极个别凋亡的卵泡颗粒细胞（GCs），而闭锁有腔卵泡上存在有多量凋亡的GCs，凋亡的形式：GCs层内...
透射电镜下，简易机械法分离得到的腔前卵泡有1~3层颗粒细胞，相邻颗粒细胞间存在明显而广泛的间隙连接，卵泡基膜完整，外无卵泡膜。培养过程中超微结构的变化与体内发育腔前卵泡类似。培养6d时观察到颗粒细胞增殖现象，培养15 d时，个别卵泡的内膜细胞开始形成。超微结构研究结果表明，本培养体系适于小腔前卵泡的体外培养。
为探讨镉对雌性生殖机能的影响， 幼鼠皮下注射孕马血清促性腺激素（PMSG），48 h后腹腔注射不同剂量的氯化镉，用琼脂糖凝胶电泳及TUNEL法对卵巢颗粒细胞进行凋亡检测；免疫组织化学法检测颗粒细胞的bax表达。结果显示注射氯化镉后48 h的高、中、低剂量组卵巢颗粒细胞（GC）凋亡率分别为（13.887 1±1.329 9）％、（10.757 3±1229 3）％、（10.020 8±0.983 ...