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蛋白质胰蛋白酶水解过程双位点漏切肽段的质谱鉴定
胰蛋白酶 基质辅助激光解吸电离-串联飞行时间质谱 细胞色素 大豆脱落胁迫成熟蛋白
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2013/9/22
为说明胰蛋白酶漏切位点数目设置对蛋白质搜库结果的影响，采用基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF)高置信度地鉴定了细胞色素C和大豆脱落胁迫成熟蛋白。在细胞色素C和大豆脱落胁迫成熟蛋白的胰酶水解液中分别发现了2个和4个双胰酶漏切位点肽段，确认了文献中报道的当赖氨酸和赖氨酸相邻或赖氨酸、精氨酸各自与天冬氨酸或者谷氨酸相邻时，会引起胰蛋白酶的漏切。此外，还发现组氨酸赖氨酸...
以十二烷基甲基丙烯酸酯(LMA)为功能单体,乙叉二甲基丙烯酸酯(EDMA)为交联剂,正丙醇、1,4-丁二醇和水为三元致孔剂,以及2-丙烯酰胺-2-甲基丙磺酸(AMPS)为电渗流产生剂,制备了聚十二烷基甲基丙烯酸酯整体柱。系统考察了AMPS含量和单体-致孔剂比例对柱性能的影响。结果表明,单体溶液和致孔剂的最佳聚合溶液质量比为35:65,其中单体溶液组成为59.5%（质量分数,下同）LMA、40%ED...
用疏水色谱(HIC)对8．0 mol／L脲变性的a一淀粉酶(a—Amy)和a一糜蛋白酶(a—Chy)的变性动力学进行了研究。结果表明：a—Amy的变性为平缓的渐变过程，其变体数目较多，且绝大多数变体的疏水性都小于天然蛋白；a—Chy是骤变(可能是瞬间变性)过程，相对而言a—Chy的变体数目较少．且疏水性均大于天然蛋白。认为两种蛋白不同的脲变动力学行为，可能是因蛋白中a一螺旋含量以及蛋白质自身稳定性...
α-胰凝乳蛋白酶离子基团的离解常数的计算
α-胰凝乳蛋白酶 离解常数
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2009/9/28
研究了当离子基团从水中转至蛋白球中时,离解常数改变的测定.借助两种溶剂-N,N-二甲基甲(DMF)酰胺和甲酰胺(FA)模拟了近程相互作用的能量变化.考虑到处于蛋白球中的离子与它们周围的电解质溶液的相互作用,研究了Bornian溶剂化能的变化.由于在酶分子中存在内球静电场,研究了离子化能的变化.以上的每项效应对Asp-102-CO2-的能量都有较大的贡献,且相互补偿.
弹性蛋白酶发酵过程中发酵液紫外吸收光谱的研究
吸收光谱 发酵液 弹性蛋白酶
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2009/5/5
研究了弹性蛋白酶发酵过程中发酵液紫外吸收光谱的变化，分析比较了发酵液吸收光谱的变化与细菌生长以及发酵产酶过程之间的联系。结果表明，弹性蛋白酶发酵液紫外吸收光谱的变化与菌体生长以及弹性蛋白产酶过程存在密切联系。紫外吸收光谱技术可以用于检测发酵液中有机氮源消耗以及弹性蛋白酶的产生等动态变化，研究为检测弹性蛋白酶发酵的动态过程提供一种比较新颖的方法，为建立紫外光谱技术在线检测发酵过程奠定了基础。
脉冲电场对木瓜蛋白酶影响的荧光光谱分析
脉冲电场 木瓜蛋白酶 酶活 荧光光谱
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2009/4/29
木瓜蛋白酶溶液在电场强度为50 kV·cm-1,频率1 500 Hz，脉冲宽度40 μs的脉冲电场下接受19 800个脉冲处理后，其活性降低了56.5％。文章采用荧光偏光光谱对处理前后的样品进行了分析。 处理后酶样的荧光强度明显大于处理前，在峰值位置其荧光强度增加超过50％，峰位从342 nm移到了346 nm左右，其荧光偏振幅度明显减小。由此推断出木瓜蛋白酶经脉冲电场处理后酶蛋白的α-螺旋结构松...
十二烷基苯磺酸钠共振散射光谱法测定木瓜蛋白酶活力
木瓜蛋白酶 酪蛋白 十二烷基苯磺酸钠 共振散射光谱法
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2009/4/28
在pH值6.5的磷酸盐缓冲溶液中，十二烷基苯磺酸钠(SDBS)与酪蛋白(Casein)形成缔合物微粒，在470，360，400，420和520 nm产生5个瑞利散射峰。在选定条件下，木瓜蛋白酶(Papain)可水解酪蛋白(Casein)，加SDBS可中止酶催化反应并与未反应的酪蛋白底物结合形成缔合物微粒。随着Papain浓度的增大，470 nm处的共振散射峰强度降低。Papain的酶活力在0.04...
低压段DHPM作用对木瓜蛋白酶结构影响的荧光光谱分析
动态高压微射流作用 低压段 木瓜蛋白酶 荧光光谱
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2010/3/23
以荧光光谱为检测手段研究了低压段(60～100 MPa)动态高压微射流作用(DHPM)对木瓜蛋白酶(Papain)分子结构的影响。结果显示，在60～100 MPa下经DHPM处理后，Papain，Tyr残基和Trp残基荧光强度均有不同程度降低，且随着处理压力的增加，Papain，Tyr残基和Trp残基的荧光强度逐渐增大，Papain，Trp残基荧光发射峰的位置分别从未处理时的334和277.5 n...
液相色谱法分离胃蛋白酶原
高压凝胶过滤色谱法 中压阴离子交换色谱法 胃蛋白酶原
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2007/12/13
首次应用高压凝胶过滤色谱和中压阴离子交换色谱提纯胃蛋白酶原，得到抗原ＰＧⅠ和ＰＧⅡ，一次提纯仅需５０ｍｉｎ。与以往文献报道的胃蛋白酶原纯化方法相比，具有简易、快速、高效的特点。
亲和色谱用无色合成配基对胰蛋白酶纯化功能的研究
亲和色谱 无色三嗪配基 胰蛋白酶
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2007/12/8
考察了一种新型的阳离子无色三嗪化合物、几种阴离子无色三嗪化合物和三嗪染料作为亲和色谱配基对胰蛋白酶的吸附性能。猪胰蛋白酶经阳离子型配基一步纯化，比活达到１１６Ｕ／ｍｇ，纯化２１．６倍，回收率８８％。
将高效凝胶排阻 (HPSEC)技术与水解度 (DH)概念相结合 ,对酪蛋白 胰蛋白酶水解体系的酶解反应过程进行分析 ,得到定量表征复杂酶解反应进程和不同DH值时多样性酶解产物相对分子质量分布的二维图线 ;依据蛋白质结构信息 ,结合HPSEC实验谱图 ,对胰蛋白酶作用于酪蛋白时的酶解断裂位点进行剖析 ,初步推断反应历程 ,并得到理论酶解肽段的相对分子质量分布图及酶解物中活性多肽酪蛋白磷酸肽 (CPP...