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原癌基因pim-3的克隆及其对肝癌细胞凋亡的影响
肝癌 原癌基因pim -3 克隆 凋亡 荧光显微镜 MTT比色试验 流式细胞术
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2009/8/17
目的: 克隆大鼠原癌基因pim-3并构建真核表达重组质粒pEGFP-N2/pim-3, 观察他在真核细胞SMMC-7721中的表达情况以及对细胞凋亡的影响. 方法: 利用TRIzol从液氮保存的大鼠骨骼肌组织中提取总RNA, 采用RT-PCR方法获取pim-3 cDNA, 并构建重组质粒pEGFP-N2/pim-3, 转化用CaCl2法制备的大肠杆菌JM-109菌株, 酶切以及测序鉴定. 将重组质...