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本发明涉及一种利用FvePILS5基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体获得再生效率高的草莓新种质的方法及应用,包括:根据草莓FvePILS5的DNA序列,设计并合成包含目的基因靶点的sgRNA序列;用Bsa I酶将合成的包含目的基因靶点的sgRNA序列连接到pYLCRISPR/Cas9Pubi?H载体;并利用农杆菌转化森林草莓叶片外植体,测序验证再生植株突变序列,得到愈伤形成和离体芽再生频率较...
RNA引导的CRISPR-Cas9系统被广泛应用于哺乳动物细胞的基因组编辑,在基因遗传病的治疗中展现出巨大的发展潜力。限制基因编辑工具应用的主要因素包括编辑活性、PAM限制、蛋白大小、特异性问题等。识别NGG PAM的SpCas9编辑活性高,是最常用的基因编辑工具。但SpCas9特异性较差,使用时往往伴随大量的有害突变。且当SpCas9用于基因治疗时,SpCas9太大无法被单个AAV递送。SaCa...
CRISPR/Cas9是源自细菌获得性免疫系统的新一代基因编辑技术,在化学生物学、生物医学及基因治疗中具有潜在应用前景。CRISPR/Cas9技术使用引导RNA(single-guide RNA,sgRNA)识别靶标基因,并招募Cas9核酸酶对基因组进行切割、编辑等操作。然而,由于sgRNA识别基因组存在非特异性结合作用,现有CRISPR/Cas9技术应用于基因编辑时存在一定的脱靶效应,且缺乏对疾...
CRISPR-Cas9基因编辑技术自2012年问世至2020年获得诺贝尔化学奖,仅历时8年,这项技术为生命科学带来了革命性影响。目前,CRISPR-Cas9技术已广泛应用于生命科学研究的诸多领域,并且已用于地中海贫血症临床治疗试验,基因编辑技术将继续对生命科学研究、基因治疗、生物产业、伦理等产生广泛而深刻的影响。
CRISPR-Cas9基因编辑工具凭借其高效、易用、灵活特性极大的改变了传统育种手段,研究人员为了扩大其靶向范围,设计了一系列SpCas9变体,包xCas9(识别5′-NG-3′、5′-GAA-3′、5′-GAT-3′ PAM)、SpCas9-NGv1和SpCas9-NG(识别5′-NG-3′ PAM)以及PAM-less SpRY然而,这些PAM-relaxed Cas9核酸酶是否会造成向导RN...
美国圣犹达儿童研究医院迟洪波教授领导的研究小组发现了一种生物途径,可以选择性地调控关键免疫细胞:称为滤泡辅助性T细胞(Tfh)的发育及体液免疫反应。 这一发现为开发激活代谢途径的药物提供了希望,从而提高疫苗的有效性,包括那些预防COVID-19的疫苗。这些药物可以刺激免疫系统在免疫后产生更强烈的反应,产生更多的抗体来对抗病毒或细菌。
新疆野苹果(Malus sieversii)是我国珍贵的第三纪孑遗植物,也是世界栽培苹果(Malus domestica)的祖先种,具有丰富的抗性基因资源价值。近年来由于农田开发、过度放牧、人为砍伐、苹果小吉丁虫危害及腐烂病爆发等原因,新疆野苹果种群面积急剧减少,已被列为国家二级濒危保护植物。新疆野苹果保育及抗性基因资源挖掘利用迫在眉睫。由于新疆野苹果的自交不亲和性和较长的幼龄期,常规的育种方法很...
2020年3月31日,复旦大学王永明课题组联合复旦大学王红艳课题组在PLOS Biology上在线发表了题为“A compact Cas9 ortholog from staphylococcus auricularis (SauriCas9) expands the DNA targeting scope”的研究论文。研究者开发出了一个新的小型CRISPR/Cas9工具,具有活性高(和SaCas...
我校生命学院孙博教授课题组与南京医科大学沈彬教授课题组合作,使用单分子光镊技术揭示Cas9蛋白与目标DNA之间相互作用的重要结合位点,并阐明这些位点在该蛋白与DNA结合、解离等过程中的重要调控作用。北京时间2019年11月14日,相关成果以“The post-PAM Interaction of RNA-guided spCas9 with DNA dictates its target bind...
2019年9月20日,生命学院栗茂腾教授课题组在生物能源领域顶级杂志Biotechnology for Biofuels发表了标题为Effective editing for lysophosphatidic acid acyltransferase 2/5 in allotetraploid rapeseed (Brassica napus L.) using CRISPR-Cas9 syste...
Notch信号转导通路对鼻咽癌的发生、发展及维持肿瘤干细胞的自我更新等具有重要作用,既往研究方法难以使Notch通路中特定基因功能完全丧失。本研究旨在利用CRISPR-Cas9基因编辑技术构建Notch1基因敲除的CNE2鼻咽癌细胞系,并观察Notch1敲除对CNE2细胞增殖、辐射敏感性的影响。方法:采用蛋白质印迹法(Western blot)检测人鼻咽癌细胞CNE2及鼻咽正常上皮细胞NP69中N...
CRISPR/Cas9作为一项革命性的基因组编辑技术已广泛应用于多种生物的基因组编辑,该技术在具体应用中存在一些问题,例如在基因组中存在的“PAM-free”和“CRISPR-tolerant”等区域无法使用传统的CRISPR/Cas9技术进行编辑;基因组中每个位点的编辑都需要构建特定的gRNA;脱靶现象也是CRISPR/Cas9技术亟须解决的问题。为解决以上问题,中国科学院天津工业生物技术研究所...
近日,陈仁金副教授带领的转基因团队,成功运用CRISPR/Cas9编辑技术获得第一例敲基因小鼠。2013年以来,CNS各大期刊接连发表运用CRISPR/Cas9在人类细胞和小鼠细胞中成功实现对基因组的定点编辑,开启了基因组编辑的新时代。运用CRISPR/Cas9系统相较于传统的ZFNs与TALENs基因编辑建立基因修饰动物模型更加快速。陈仁金副教授去年到中科院神经科学研究所进行了为期4个月的学习进...
UC San Francisco researchers have discovered a way to switch off the widely used CRISPR-Cas9 gene-editing system using newly identified anti-CRISPR proteins that are produced by bacterial vi...
Two new studies from UC Berkeley should give scientists who use CRISPR-Cas9 for genome engineering greater confidence that they won’t inadvertently edit the wrong DNA.The gene editing technique, creat...

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