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针对不同形式猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5重组蛋白的抗体中和活性比较
猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5 杆状病毒表达系统 真核表达 中和试验
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2018/6/26
GP5蛋白被认为是猪繁殖与呼吸综合征病毒诱导中和抗体的主要蛋白,为探讨GP5蛋白诱导免疫保护的能力,本研究用杆状病毒/昆虫表达系统分别表达了全长和截短的GP5蛋白,同时用大肠杆菌表达系统表达了截短的GP5蛋白。三种重组蛋白经纯化后,免疫小鼠制备抗血清,以PRRSV全病毒作为ELISA包被抗原检测抗血清时,原核表达的截短GP5蛋白抗血清效价为1∶200,真核表达的全长GP5蛋白抗血清效价为1∶800...
利用谷胱甘肽一s一转移酶(GST)表达系统将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF5和ORF6基因依序串联于GST下游,并在大肠杆菌中成功表达,获得了大小约为60kD的融合蛋白GST—GP5一M,Western blot检测证实表达的融合蛋白具有良好的生物学活性。以纯化的融合蛋白为抗原建立了猪繁殖与呼吸综合征P56一ELISA检测方法,与国外试剂盒IDEXX—ELISA总符合率为94.1% ...