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gga-miR-155对MDCC-MSB1细胞生物学行为的影响
gga-miR-155 MDCC-MSB1细胞 细胞增殖 细胞凋亡 迁移 侵袭
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2019/1/17
为了解gga-miR-155对MDCC-MSB1细胞生物学行为的影响，将人工合成的gga-miR-155模拟物、gga-miR-155抑制物以及阴性对照瞬时转染MDCC-MSB1细胞。然后采用实时荧光定量PCR （RT-qPCR）检测MDCC-MSB1细胞中gga-miR-155的表达水平，CCK-8法检测转染后细胞增殖能力的变化，流式细胞术检测MDCC-MSB1细胞的细胞周期与凋亡的变化，Tra...
鸡基质蛋白3核定位信号的预测与鉴定
鸡 基质蛋白3 核定位信号 细胞核定位
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2019/1/17
本研究旨在预测和鉴定鸡基质蛋白3（matrin 3，MATR3）的核定位信号（nuclear localization signal，NLS）。通过核定位信号在线预测软件预测鸡MATR3蛋白中存在的假定NLS （putative NLS，pNLS），根据预测结果构建鸡MATR3蛋白pNLS缺失的重组真核表达载体，转染细胞后通过观察缺失体重组蛋白的亚细胞定位来确定其NLS。根据鸡MATR3蛋白NLS...
为了研究噬菌体Bp7蛋白gp38在噬菌体吸附宿主菌过程中的作用，PCR扩增gp38基因，对gp38蛋白氨基酸序列特征进行分析和同源性比对，构建重组表达质粒pColdTF-gp38，在E.coli BL21中诱导表达，SDS-PAGE电泳和Western blot检测重组蛋白gp38的表达；亲和层析法纯化蛋白，制备gp38多克隆抗体。免疫电镜检测gp38在噬菌体Bp7表面的定位，蛋白竞争试验和抗体阻...
过量维生素A对育成期雄性水貂生长性能及血清生化指标的影响
水貂 维生素A 生长性能 血清生化指标
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2019/1/17
旨在讨论饲粮中过量维生素A对育成期水貂生长性能、营养物质代谢及血清生化指标的影响。本研究采用单因素随机试验设计，选择雄性水貂90只，随机分成6组，每组15个重复，维生素A添加水平分别为0（对照组）、5 000（Ⅰ组）、20 000（Ⅱ组）、80 000（Ⅲ组）、320 000（Ⅳ组）及1 280 000 IU·kg-1（Ⅴ组）（干物质基础）。预饲期7 d，正式试验期60 d。正式期开始第30天每组...
为了探索β-葡聚糖对绵羊瘤胃上皮细胞（ruminal epithelial cells，RECs）β-防御素-1（sheep β-defensin-1，SBD-1）表达的影响。本研究首先建立绵羊RECs培养体系作为体外试验模型，用不同浓度（0、5、10、20、50和100 μg·mL-1）的β-葡聚糖刺激RECs 8 h后，利用qPCR和ELISA方法检测RECs中SBD-1的表达变化，选出诱导S...
牛卵泡颗粒细胞PRSS35表达模式及功能研究
牛 卵泡 颗粒细胞 PRSS35
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2019/1/17
旨在探究丝氨酸蛋白酶35（serine protease 35，PRSS35）在牛卵泡颗粒细胞（granulosa cells，GCs）中的表达及功能。采用B超超声波检测确定牛优势卵泡（dominant follicle，DF）与从属卵泡（subordinate follicles，SF），分离优势卵泡与从属卵泡颗粒细胞；利用qRT-PCR和Western blotting技术检测PRSS35在D...
小鼠miR-487b-3p对C2C12增殖和分化调控作用的研究
小鼠 miR-487b-3p 增殖 分化 PITX2
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2019/1/17
旨在研究miR-487b-3p对小鼠C2C12细胞增殖与分化的具体调控机制。本研究以小鼠成肌细胞系（C2C12）为研究对象，利用qRT-PCR检测miR-487b-3p在小鼠各组织和C2C12细胞增殖与分化过程中的表达情况；通过转染miR-487b-3p mimics和miR-487b-3p inhibitor后，利用qRT-PCR检测转染效率，并采用qRT-PCR和Western blottin...
促肾上腺皮质激素对母猪肝中葡萄糖代谢相关酶转录表达及活性的影响
ACTH 肝 糖代谢 母猪
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2019/1/17
旨在研究促肾上腺皮质激素（adrenocorticotropic hormone，ACTH）对母猪肝中葡萄糖代谢相关酶转录表达及活性的影响，以探讨应激状态下肝调节血糖水平的分子机制。本研究选取9头健康经产断奶苏淮母猪，随机分成处理组（5头）和对照组（4头）。对处理组母猪注射外源ACTH，对照组母猪注射生理盐水；每天处理3次，连续7 d。试验期间每天采集母猪血液；试验结束后，取母猪肝组织。利用放射免...
基于RNA适配体检测体外酶促合成的c-di-GMP和cGAMP
RNA适配体 c-di-GMP cGAMP 荧光检测
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2019/1/16
旨在建立简单、快速的检测体外酶促合成的c-di-GMP和cGAMP的方法。本研究以含有T7启动子、VC2 GEMM-1核糖开关序列或其突变序列VC2/g20a、spinach2和tRNA序列的双链DNA为模板，利用T7 RNA聚合酶体外转录体系制备VC2、VC2/g20a RNA适配体。通过检测绿色荧光强度分析RNA适配体对c-di-GMP和cGAMP的结合能力。结果表明，转录得到的RNA经过加热...
F18大肠杆菌抗性型与敏感型苏太断奶仔猪十二指肠组织比较转录组分析
猪 F18大肠杆菌 抗性基因 调控通路
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2019/1/16
旨在揭示培育品种-苏太猪（杜洛克×梅山猪）F18大肠杆菌抗性的调控通路和重要候选基因，同时进一步探究中外猪品种F18大肠杆菌抗性调控遗传基础的差异。本研究以课题组前期获得的苏太猪和梅山猪F18大肠杆菌抗性型与敏感型断奶仔猪全同胞个体为研究对象，通过转录组测序筛选苏太猪F18大肠杆菌抗性相关的调控通路以及重要候选基因，并在细胞水平，利用qPCR和Western blot分析F18大肠杆菌刺激小肠上皮...
高通量测序分析Nisin对腹泻小鼠肠道菌群的影响
Nisin 致病性大肠杆菌 高通量测序
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2019/1/16
采用高通量测序研究乳酸链球菌素（Nisin）对腹泻小鼠肠道菌群结构的影响。通过腹腔灌注E.coli O1建立腹泻病小鼠模型，通过动物体内保护率试验筛选出最佳药物剂量，将小鼠随机分为空白对照组、阴性对照组、氨苄青霉素、盐酸环丙沙星组和Nisin组。连续灌胃15 d，收集盲肠粪便，采用高通量测序对5组样品进行分析。结果表明：1）E.coli O1可使腹泻小鼠十二指肠绒毛断裂；Nisin可增加淋巴细胞百...
为了探讨骨保护素（osteoprotegerin，OPG）对破骨细胞及其前体自噬与凋亡的影响，本研究以RAW264.7细胞诱导分化形成的破骨细胞（osteoclasts，OCs）及其前体（osteoclast precursors，OCPs）为研究对象，通过自噬促进剂雷帕霉素（rapamycin，RAP）或自噬抑制剂氯喹（chloroquine，CQ）分别预处理1 h和30 min后，再添加80 ...
本研究旨在探讨猪肺泡巨噬细胞传代细胞系3D4/21中转化生长因子β1（TGF-β1）表达和纤连蛋白（Fn）/α5整合素与副猪嗜血杆菌侵入的关系。通过吸附/侵入试验选择副猪嗜血杆菌最佳吸附/侵入条件；运用荧光定量PCR和ELISA方法检测副猪嗜血杆菌感染细胞后对TGF-β1表达的影响；用TGF-β1预处理3D4/21细胞后，用CFU检测TGF-β1表达对副猪嗜血杆菌侵入的影响；用流式细胞术检测副猪嗜...
三种多糖对鸡胚肝细胞抗氧化能力的影响
多糖 鸡胚肝细胞 抗氧化能力
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2019/1/15
为了研制抗氧化中药多糖制剂，比较了枸杞多糖（LBP）、白术多糖（AMP）和当归多糖（CAP）对鸡胚肝细胞（CEL）的抗氧化能力的影响，以维生素C（VC）为对照。首先测定了4个药对CEL的安全浓度，然后取安全浓度范围内3种浓度的各药分别加入到CEL的培养体系中，培养24 h后加入H2O2攻击1 h，测定细胞活力（A570 nm）、细胞内ROS含量、GSH-Px和SOD的活性。结果显示，H2O2组的A...